亚洲1型FMD病毒样颗粒展示O型FMDV优势中和表位的研究

本项目拟采用缺损型腺病毒为载体、Asia 1型FMDV的VLP为骨架，将O型FMDV的保守优势中和表位插入Asia 1型FMDV VLP表面G-H环区域的多个不同位点，从而将表位嵌合在Asia 1 FMDV VLP的主要免疫优势区（major immunodominant region, MIR）。将缺损腺病毒的载体优势与口蹄疫VLP的免疫原性优势结合起来，研究FMDV-VLP骨架对于短肽插入的韧性和耐受性及展示表位的免疫原性，期待在Asia 1 FMDV VLP的不同侧翼序列支持下正确展示O型中和表位的构象，获得该嵌合的抗原表位的优势结构特征。该项目的研究结果对于FMDV VLP耐受性及病毒衣壳稳定性的深入研究具有重要的意义，并且可为进一步研究和开发Asia 1型FMDV VLP展示O型表位的二价疫苗奠定基础。

口蹄疫（Foot-and-mouth disease, FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV）引起，感染偶蹄动物的高度接触性传染病。FMDV属微RNA病毒科口蹄疫病毒属成员，包含O、C、A、Asia1型和SAT1、2、3型等七个不同的血清型和多个亚型，不同血清型毒株之间不能交叉保护，同一血清型的不同亚型毒株之间不能完全交叉保护。.中和表位在FMDV抗体介导的免疫保护中起重要作用。本实验室已精确鉴定一个O型FMDV保守性中和表位，在此基础上，本研究利用Asia1型FMDV高度重复有序的病毒衣壳展示该O型中和表位，目标是增强该表位的免疫原性。首先，将O型FMDV中和表位的编码序列分别插入到Asia1型FMDV G-H环的139/140、150/151、134/140位或同时插入到139/140和150/151位，利用人缺损型腺病毒作为载体构建了4个表位嵌合的Asia1型衣壳蛋白。接种小鼠后，所有插入单个O型中和表位的嵌合衣壳均诱导抗O型FMDV的中和抗体，表明插入的表位被暴露在衣壳表面。比较而言，在139/140或150/151位插入表位比在134/140位插入诱导出更高水平的O型FMDV中和抗体，表明G-H环内的139/140和150/151位点能更有效地展示外源表位。同样，在评价表位嵌合衣壳诱导的针对Asia1型FMDV的免疫应答时发现，在139/140或150/151位插入外源表位的嵌合衣壳比在其他位点插入诱导出更强的免疫应答，其诱导的中和抗体水平与未插入表位Asia1型衣壳所诱导的中和抗体水平相近，表明在这两个位点分别插入单个表位不会影响Asia1型衣壳的免疫原性。这些研究结果揭示，在FMDV衣壳表面展示外源中和表位，不仅能够诱导针对表位的中和抗体，而且不破坏病毒衣壳蛋白诱导中和抗体的能力，由此表明，FMDV衣壳可作为有效的载体开发展示表位的疫苗。