淋巴管生成新型抑制因子 sVR2 在食管癌中的功能及其差异表达调控

我们近年研究发现，淋巴管生成新型抑制因子sVR2（soluble VEGF Receptor 2）在有/无淋巴结转移患者的食管癌组织中显著差异表达，前者的表达水平明显降低，说明sVR2可能是一种重要因素，在癌细胞的淋巴结转移中发挥负调控功能。然而，中间是否有由sVR2低表达诱发的癌组织淋巴管生成环节介导，以及为何sVR2在食管癌组织中差异表达等，均是新的重要科学问题，需要全面系统研究。最近，我们从食管癌miRNA表达谱中，获得了6个在有淋巴结转移癌组织中显著上调的miRNA，其靶向结合位点存在于sVR2 mRNA3'端的独特序列上，提示sVR2在食管癌中的差异表达可能与上述miRNA的特异性调控有关。基于此，本项目拟在系统证明sVR2低表达诱发食管癌组织淋巴管生成，进而促进癌细胞淋巴结转移的基础上，从转录后层面，结合相关细胞信号转导通路研究，揭示sVR2在食管癌中差异表达调控的分子机制。

本项目的研究计划包括，1）研究有/无淋巴结转移患者食管癌组织和血液中sVR2与其它淋巴管因子之间的平衡关系情况，以及淋巴管标志分子在食管癌组织中的定位；2）筛选出合适的食管癌细胞系，通过基因表达干预手段建立多重sVR2高表达与低表达食管癌细胞模型，研究揭示sVR2在食管癌中的功能；3）从转录后调控层面，深入揭示sVR2在食管癌中差异表达调控的分子机制。.按前述研究计划，首先，我们研究发现，1）与健康人群相比，ESCC(Esophageal Squamous Cell Carcinoma)患者血浆中sVR2的含量显著低于健康人群，且与肿瘤浸润深度呈负相关关系；2）T3期ESCC患者sVR2水平明显低于T2期患者；3）ESCC患者血浆中VEGF-C的含量与健康人群的相比，以及与T分期等临床参数间均未见统计学意义；4）与相对正常食管上皮组织相比，食管癌组织中sVR2的mRNA的表达水平是下调的，而且与ESCC患者pTNM分期呈现负相关关系；5）癌组织中VEGF-C的mRNA水平的上调与pTNM分期等临床参数之间未见明显相关；6）ESCC患者癌组织中sVR2蛋白呈低表达状态；7）sVR2蛋白在癌细胞浆中的聚集程度与淋巴结转移数呈现正相关关系，即sVR2蛋白在癌细胞浆中的染色越强，ESCC患者淋巴结转移数越多；8）癌细胞中聚集较多sVR2蛋白的ESCC患者，其总生存率明显低于sVR2蛋白聚集较少的ESCC患者；9）sVR2蛋白在癌细胞浆中的聚集程度是一独立预后判定因子；10）LYVE-1和D2-40可作为食管鳞癌微淋巴管的特异性标记物。其次，我们在sVR2高表达食管癌细胞模型上研究确定sVR2具有抑制食管癌细胞迁移的功能。最后，我们研究发现，sVR2基因3′UTR具有很强的调控报告基因表达的活性；然而不同的食管癌细胞呈现出截然相反的行为表现，这可能是不同的食管癌细胞的异质性内环境，比如相应的miRNA表达谱差异所致，暗示着sVR2基因本身在食管癌发生发展中表达调控的分子机制是十分复杂的，可能有更重要的科学问题孕育其中，有关情况正在继续深入探讨中，相应的更详尽的实验结果将在项目结题后的汇报材料中按时上呈。.在上述研究基础上，迄今项目已发表SCI论文1篇（标记基金项目号81071737），同时培养中青年学术带头人1人，博士研究生1名，硕士研究生3人。