microRNA 在姜黄素抗角膜新生血管中的作用及机制研究

角膜新生血管是多数角膜疾病过程中的重要环节，其可破坏角膜免疫赦免，导致角膜浑浊，严重影响视力甚至致盲，其治疗十分棘手。姜黄素具有良好的抗增殖、抗新生血管的作用。我们前期研究发现姜黄素通过调节NF-κB信号通路，导致炎症因子改变，而抑制碱烧伤所致的角膜新生血管。本课题(1)拟对角膜新生血管模型microRNA(miRNA)表达谱进行检测，发现差异表达的miRNA；(2)用生物信息学方法预测靶基因为NF-κB的miRNA，阐述miRNA对NF-κB基因在角膜新生血管形成过程中的调控作用；(3)研究姜黄素对NF-κB相关miRNA的调节作用，证实关键miRNA差异表达在姜黄素抑制角膜新生血管中起重要作用；(4)预测角膜新生血管miRNA表达谱中其它显著差异表达的miRNA的靶基因及功能，将生物信息学和临床有机结合。研究结果可在miRNA调节水平为解释角膜新生血管形成机制及防治提供理论和实验依据。

本研究采用基因芯片、流式细胞学，PCR，Western Blot,免疫组织化学等方法，研究姜黄素（Curcumin）在角膜新生血管病程中的作用。我们的研究证实了我们的假设，发现姜黄素通过抑制MicroRNA-146a影响NF-KappaB的活化从而在以下几方面作用于角膜血管新生的过程：（1）姜黄素治疗组的小鼠的角膜愈合率和透明度都高于对照组,新生血管形成明显少于对照组(P<0.05)；（2）姜黄素治疗组的角膜在第4天中性粒细胞浸润明显低于对照组；（3）基因芯片显示姜黄素处理后的人脐静脉内皮细胞中有11个上调的基因和18个下调的基因，PCR证实了基因芯片的结果显示microRNA-146a的变化；（4）姜黄素治疗后降低的角膜中的MMPs和炎症因子-表达明显降低。上述结果证实了我们提出的假说，姜黄素可以通过影响MicroRNA从而抑制角膜NF-KappaB从而降低MMPs和炎症因子的表达，减少中心粒细胞浸润，达到抑制角膜新生血管的作用。