基于SIRPα调节HBV相关性肝癌患者外周血DCs的活化研究鳖龙软肝汤对其抑制肿瘤的影响

Immune evasion of the tumor cell are closely related with immune function disorder.The immune function disorder of HBV-associated hepatocellular carcinoma patients not only because of tumor cell’s influence but also be HBV infection effect. There are inimitable advantage in which traditional Chinese medicine interfere in immunity adjustment, Most of the treatment of Liver-discharging and Spleen-nourishing, activating circulation to remove blood stasis, heat-clearing and detoxifying such as the rule of law,but there still is no conclusive data about the key of Chinese Traditional Medicine’s effect.This study was to establish a immune model of HBV-associated hepatocellular carcinoma in vitro and analyze the effect of Liver-discharging / Spleen-nourishing/ Activating circulation to remove blood stas. The proposed approach provides a new idea for the immunoregulation mechanism of HBV-associated hepatocellular carcinoma with the effect of Chinese Traditional Medicine

肿瘤细胞的免疫逃避与机体的免疫功能紊乱息息相关，乙肝相关性肝癌患者机体的免疫功能紊乱除受肝癌细胞本身影响外，HBV感染亦是重要因素。中医治疗在调理恢复多途径多因素所致免疫紊乱方面有独特优势，临床上多以疏肝健脾、活血化瘀、清热解毒为治则，但其关键作用环节目前仍无定论。本研究以CD47-SIRPα为切入点，联系HBV感染与肿瘤侵袭两方面因素，通过建立乙肝相关性肝癌自体组织裂解物作为抗原刺激树突状细胞、并与T淋巴细胞共培养得到特异性CTL杀伤自体肝癌细胞的免疫细胞模型，应用血浆药理学方法，对抗原呈递过程的各个阶段进行干预比较，以探索具有疏肝理脾活血功效的鳖龙软肝汤在乙肝相关性肝癌患者体内抗原呈递过程的何种阶段发挥关键作用，为中医中药对乙肝相关性肝癌的免疫调节的机理研究提供新的思路。

乙型肝炎病毒（HBV）感染是肝细胞癌（HCC）的高危因素。细胞免疫应答对于HCC发展是尤其重要，其中CD4+和CD8+ T细胞亚型被认为是主要的抗肿瘤免疫细胞。在本研究中，我们研究了中药汤剂鳖龙软肝汤中君药桃仁的有效单体苦杏仁苷（amygdalin）的作用和机制。苦杏仁苷是一种从植物桃仁中分离出来的一种天然皂苷，与HBV相关的肝癌细胞免疫应答和肝癌进展。此次，我们证明苦杏仁苷治疗可以回复HBV-T细胞活力和细胞因子IFN-γ，TNF-α和IL-2的产生。通过流式细胞仪检测到在HBV-T细胞中，CD4+和CD8+的荧光强度水平显著低于NC-T细胞，并且可以通过苦杏仁苷处理来回复，提示苦杏仁苷能促进T淋巴细胞的成熟和活化。此外，与NC-T细胞相比，HBV-T细胞中STAT3和JAK2表达以及磷酸化水平更高，并且可以通过苦杏仁苷处理来降低。与HBV-T细胞共培养可降低IFN-γ，TNF-α和IL-2的产生，同时增加HepG2.2.15细胞中IL-10的产生；苦杏仁苷预处理可以部分逆转这些改变。最后，与HBV-T细胞共培养显著促进HBV相关肝癌细胞HepG2.2.15的活力，抑制细胞凋亡，促进HepG2.2.15细胞的侵袭和迁移，这些改变能通过苦杏仁苷部分逆转。我们的研究结果进一步研究了中药汤剂鳖龙软肝汤中的主要成分苦杏仁苷通过T细胞介导的肿瘤免疫，抑制HBV相关的HCC细胞活力，凋亡，侵袭和迁移的功能和机制。提示了苦杏仁苷作为肿瘤免疫调节的应用前景。