基于PPARγ通路的藏药俄色防治“京尼萨库”病的分子机制研究

"Jing-ni-sa-ku" is a systemic disease, characterized by urine turbidity and constantly dripping, which was documented by Tibetan medicine long time ago. Previous research confirmed that the key pathogenesis of "Jing-ni-sa-ku" is glucose and lipid metabolism dysfunction caused by insulin resistance, and a lot of traditional Tibetan medicine, including "E-se"(documented firstly in "Jing-zhu-ben-cao") and prescription preparations could treat "Jing-ni-sa-ku" by improving insulin resistance. We hypothesis thar "E-se" regulate insulin signaling pathway via activating PPARγ to prevent and treat "Jing-ni-sa-ku". Therefore, we plan to illuminate the molecular mechanism and the bioactive chemical constituents of serum. To solve these problems, KK-Ay mouse, a spontaneous diabetes mellitus model, 3T3-L1 adipocyte insulin resistance model and UPLC-Q-Tof-MS will be used in our program. Besides exploring modern pharmacological research basis for the traditional Tibetan medicine ,such as "E-se",the project also aim to providing a new idea and means for the prevention and treatment of glucose and lipid metabolism dysfunction, which is of important academic value and broad application.

京尼萨库作为藏医很早就认识到的以尿液浑浊、淋漓不断为特征的一种全身性疾病，我们前期研究证实其关键病机在于胰岛素抵抗导致的糖脂代谢障碍，并发现包括俄色（《晶珠本草》）在内的多种传统藏药材及成方制剂可通过改善胰岛素抵抗而干预京尼萨库的发生发展。本研究基于传统藏药俄色可能通过激活PPARγ调节胰岛素信号通路，改善胰岛素抵抗从而达到预防和控制“京尼萨库”病的科学假说，采用KK-Ay自发性糖尿病小鼠模型、3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型以及超高效液相色谱与高分辨率质谱联用对含药血清化学成分分析，阐释藏药俄色预防和控制“京尼萨库”病的作用分子机制。该项目不仅可为传统藏医药及特色药材俄色防治京尼萨库病提供现代药理学研究基础，也为严重危害人类健康的糖脂代谢疾病防控提供一种新的思路和手段，具有重要的学术价值和广阔的应用前景。

京尼萨库作为藏医很早就认识到的以尿液浑浊、淋漓不断为特征的一种全身性疾病，我们前期研究证实其关键病机在于胰岛素抵抗导致的糖脂代谢障碍，并发现包括俄色（《晶珠本草》）在内的多种传统藏药材及成方制剂可通过改善胰岛素抵抗而干预京尼萨库的发生发展。本研究基于传统藏药俄色可能通过激活PPARγ调节胰岛素信号通路，改善胰岛素抵抗从而达到预防和控制“京尼萨库”病的科学假说，采用KK-Ay自发性糖尿病小鼠模型、3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型和链脲菌素所致的糖尿病小鼠模型，阐释藏药俄色预防和控制“京尼萨库”病的作用分子机制。研究结果表明藏药俄色可有效降低KK-Ay自发性糖尿病小鼠模型的血糖、FFA、AGEs、GHbA1c、INS、TC、TG、TNF-α水平；OGTT测试中，各剂量组各时间点血糖值及AUC值均降低；肝脏油红染色结果提示变叶海棠可降低肝脏组织众脂滴表达面积百分比；免疫组化法检测脂肪细胞中PPAR-α、γ蛋白含量，结果提示变叶海棠可增加脂肪细胞中PPAR-α蛋白含量的表达；WB检测肾周组织P-AKT、P-GSK 3β蛋白，结果提示变叶海棠可增加肾周脂肪组织P-AKT、P-GSK 3β蛋白表达。通过3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型，俄色提取物、根皮苷、根皮素能有效改善前脂肪细胞的成脂性，降低葡萄糖消耗率和脂肪细胞中FFA、TC、TG的分泌，增加脂联素及FGF21分泌。其作用机制可能与改善胰岛细胞损伤、激活PPAR，减少FFA和TNF-α释放，并增加脂联素的分泌来调节脂肪组织的发育及代谢，改善胰岛素抵抗有关。该项目不仅可为传统藏医药及特色药材俄色防治京尼萨库病提供现代药理学研究基础，也为严重危害人类健康的糖脂代谢疾病防控提供一种新的思路和手段，具有重要的学术价值和广阔的应用前景。