用定点突变技术研究肌酸激酶活性部位结构与功能

在用定点突变技术研究肌酸激酶活性部位结构与功能的工作中，筛选出了大鼠肌肉肌酸激酶CDNA的克隆；获得了该酶基因在大肠杆菌中融合表达和成熟表达产物。在虫荧光素酶N未端缺失对其结构和功能影响和研究工作中，首先进行了虫荧光素酶N未端缺失6、10、20个氨基酸的工作，目的是要发现N未端缺失多少个氨基酸后才会对酶的活性有比较大的影响，研究结果发现，缺失6个氨基酸后，酶仍保持大部分活性，但缺失10个20个氨基酸酶后，酶完全丧失活性。显然6至10之间的氨基酸最为关键，所以，我们又进行了缺失7个、8和4个氨基酸的工作，发现缺失后的酶都没活性了。说明第7个氨基酸对维持酶活性起着重要的作用。