肿瘤相关巨噬细胞在乳腺癌耐药中的作用及机制研究

肿瘤相关巨噬细胞（TAM）在乳腺癌发生发展中起着重要作用，但在乳腺癌耐药中的作用及机制尚不清楚。我们最近研究发现，TAM可降低乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性。结合我们前期研究线索及相关文献，我们推测，TAM很可能通过高表达COX-2，分泌PGE2，从而激活肿瘤细胞β-catenin相关信号通路，调控下游分子MDR相关蛋白的表达，参与乳腺癌耐药。为证实此假设，我们将首先分析临床标本中TAM分布及其COX-2表达水平与乳腺癌化疗敏感性之间的相关性；随后通过体外共培养TAM及乳腺癌细胞的方式，探析TAM中COX-2表达与乳腺癌细胞β-catenin通路激活及MDR之间的关系及机制；最后通过乳腺癌动物模型，证实TAM中COX-2对乳腺癌化疗敏感性的影响及机制。本课题可为肿瘤微环境在肿瘤耐药方面的研究提供新思路，为TAM成为肿瘤治疗新靶点及COX-2抑制剂在肿瘤治疗中的应用提供实验依据。

本研究拟通过采集临床乳腺癌标本、建立乳腺癌动物模型、以及乳腺癌细胞体外培养等方式，从整体、细胞和分子水平阐释肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages, TAM）对乳腺癌耐药产生的影响及分子机制。通过3年的探索研究，我们得出以下结果：（1）TAM可降低乳腺癌细胞对多种化疗药物的敏感性，促进乳腺癌细胞外排药物增加，导致乳腺癌耐药的产生；（2） TAM可促进乳腺癌细胞过表达耐药相关蛋白P-gp及凋亡抑制因子Bcl-2，低表达促凋亡因子Bax;（3）COX-2/PGE2信号途径在炎症及肿瘤发生发展中扮演重要角色，是连接炎症及肿瘤进程的重要通道。人乳腺癌组织中TAM及体外诱导的TAM均过表达COX-2， COX-2+ TAM不仅在乳腺癌组织中高表达，且与乳腺癌临床分期、组织学分级以及淋巴结转移等相关，与乳腺癌组织中增殖相关因子ki67的表达呈正相关，可降低患者远期10年总体生存率，并可作为乳腺癌预后的独立预测因子之一。（4）TAM中过表达的COX-2可增强TAM诱导乳腺癌细胞耐药的功能，可调控乳腺癌细胞中P-gp、Bcl-2和Bax的表达，可诱导巨噬细胞向M2型转化，在TAM功能发挥中起着关键作用；（5）TAM中过表达的COX-2可诱导乳腺癌细胞中PI3K/Akt信号通路的激活，进而调控下游信号分子P-gp、Bcl-2和Bax的表达，抑制该信号通路可逆转COX-2+ TAM的促乳腺癌耐药作用。总之，通过本研究将有利于进一步洞悉肿瘤微环境参与乳腺癌耐药的分子模式，并为乳腺癌耐药的逆转及新靶点的寻找提供了有价值的实验依据。