二化螟对Bt水稻早期抗性的遗传与分子检测技术研究

本项目以Bt水稻的靶标害虫二化螟为研究对象，采用F1/F2代家系和诊断剂量相结合的方法对我国转基因水稻环境释放地的二化螟种群进行检测，明确其田间抗性初始基因频率，汰选出对Bt有耐受性的家系，建立早期抗性的遗传检测方法；基于抗性汰选和近等基因系的建立，对抗、感种群和田间耐受个体Bt受体蛋白（氨肽酶-N和钙粘蛋白）基因进行克隆，并获全长序列；对抗、感种群受体全长序列进行比对，找出抗性突变点，应用Bi-PASA技术，对田间耐受个体进行Bi-PASA检测；此外，将抗、感种群与田间耐受个体受体全长序列进行比对，明确田间耐受个体在基因水平的变异，根据基因变异水平，判断田间个体抗性发展水平，建立早期抗性的分子检测方法。该研究对于阐明二化螟对Bt抗性产生的分子机制，建立和完善我国水稻害虫对Bt的抗性监测与预警体系，实施预防性的抗性治理策略及实现我国Bt水稻的可持续应用和健康发展均具有重要的理论和实践意义。