Gαq对Breg的分化和功能的调控及机制研究

Autoimmune diseases（AID）arise from an abnormal immune response of the body against substances and tissues normally present in the body. Regulatory B (Breg) cells, the immunosuppressive cells that support immunological tolerance, play an important role in the occurrence and development of AID. Signals controlling the generation of Breg cells remain ill-defined. Our group has demonstrated that Gαq, the alpha subunit of Gq protein, regulates autoimmunity. Our preliminary data showed an abnormal differentiation of Breg in the Gnaq-/- mice, and the ability to inhibit T cell proliferation of those Bregs was impaired. These data imply that Gαq may be involved in AID pathogenesis by regulating Breg development and function. The aim of this project is to clarify the regulation of Gαq on Breg differentiation and function, as well as its underline molecular mechanisms. This study will deepen our knowledge in the role of Breg differentiation and provide us new insights in the treatment and surveillance of AID

自身免疫性疾病（AID）是由于免疫调节紊乱或免疫耐受被打破而形成的一组常见病。调节性B细胞（Breg）是一种免疫抑制细胞，在AID发病及发展中扮演着重要角色，然而其分化机制尚未明确。Gαq是由Gnaq编码的Gq蛋白alpha亚单位。申请人所在课题组的既往研究证实Gαq参与调控AID。申请人预实验发现Gnaq-/-小鼠的Breg分化存在异常，经诱导产生的Breg细胞明显少于野生型小鼠，且Breg细胞抑制T细胞增殖功能也存在缺陷。据此我们提出科学假设，Gαq调控Breg的分化与功能是其参与AID发病的途径之一。本项目拟借助Gnaq-/-小鼠，详细研究Gαq对Breg细胞分化和功能的调控作用，并阐明其作用的分子机制。本项目的完成有助于深入研究Breg细胞分化的分子机制，也为AID治疗和病情监测的新靶点的选择提供理论依据。

背景:最近的研究表明，Gαq在免疫调节中起着至关重要的作用，但Gαq如何调节调节B细胞(regulatory B-cell, Breg)的功能尚不清楚。研究内容: 首先通过体外细胞实验检测Gαq对Breg的调控作用，包括对Breg分化，功能的调控及对Breg细胞凋亡的影响。接下来探索Gαq调控Breg分化及功能的机制，我们通过western及信号通路抑制剂双向验证寻找Gαq对Breg分化调节的信号分子。再通过ELISA及流式检测Gαq对Breg抑炎因子分泌的调控及Breg表面共刺激分子的调控。从而阐明Gαq对Breg分化和功能调控的分子机制。在自身免疫性疾病患者中进一步验证Gαq与Breg相关性。重要结果:CD19+IL-10+Breg在Gnaq−/−小鼠中的分化受到抑制。此外，Gαq缺失导致Breg抑制T细胞增殖的功能受损，这可能与减少Treg扩增有关。我们的数据表明，PI3K、Erk1/2和p38 MAPK信号通路是调节Gαq对Breg的作用所必需的，而阻断这些信号通路会影响Breg的分化。与我们之前的研究一致，我们也发现在类风湿性关节炎患者中CD19+CD24hiCD38hiBreg的频率降低。如预期的那样，CD19+CD24hiCD38hiBreg与Gαq mRNA表达呈显著正相关。.结论及意义:Gαq在Breg的分化和免疫抑制中发挥重要作用，可能为自身免疫性疾病的治疗提供新的靶点