高效液相色谱与共振瑞利散射联用新技术的研究及其在药物分析和水环境中药物检测的应用

High Performance Liquid Chromatography (HPLC) now is an important technology based on its efficient separation and analysis abilities, and it is also an important way to develop HPLC with researches on a new combination technology and analysis method. As a new developing analysis technique, Resonance Rayleigh Scattering (RRS) offers extending advantages in terms of high sensitivity and wide application. Then a new efficient and sensitive analysis method can be constructed by the combination of HPLC and RRS (HPLC-RRS). In this project, we will mainly focus on the suitable derivative of RRS, doable post-column derivatization device, corresponding stationary phase and mobile phase and optimized chromatographic conditions, which should be helpful to further development the HPLC hyphenated techniques. .In order to make the HPLC-RRS combination technique can be used effectively in analytical chemistry, we will pay our attention to the studies of the pre-column and the post-column derivatization of HPLC-RRS, and its application in drug analysis in water environment (especially the detection of antibiotics and pesticide residue in water environment), the clinical examination and the pharmacokinetic study. Our work presented in this project should have important theoretical and applied prospects, because it is expected to help us develop the HPLC-RRS combination technique and establish a new detection method in analytical chemistry, extend the application fields of RRS method, and provide a fundamental and pioneering work.

高效液相色谱（HPLC）是一种重要的分离和分析技术，研究新的联用技术和检测方法是发展HPLC的重要途径。共振瑞利散射（RRS）是新发展起来的分析技术，它具有灵敏度高、应用范围广的特点，通过两者的联用可将HPLC的分离能力与RRS的高灵敏度相结合，开拓新的分析方法。本项目将重点研究适于RRS检测的衍生方式、衍生装置以及相应的固定相、流动相以及色谱条件的优化，进一步发展HPLC的新联用技术。.为了使这一技术能在分析化学中得到更好的应用，我们侧重研究HPLC-RRS联用的柱后衍生和柱前衍生技术及其在水环境中药物分析（尤其是水环境中的抗生素、农残的检测等）、临床检验和药代动力学研究中的应用。研究工作不论对HPLC联用和新检测方法的发展，还是对RRS技术分析应用领域的拓展均具有重要的理论意义和应用前景，也是一项具有前沿性的研究工作。

高效液相色谱（HPLC）是一种重要的分离分析技术，也是分析化学的重要组成部分。目前HPLC的检测手段较多，较常用的有紫外-可见法、荧光法、化学发光法、电化学法等。但是紫外-可见法检测灵敏度较低，不利于恒量分析，而且检测目标物必须是近紫外区和可见光区有光吸收的物质，不宜用于不含芳香环的脂类和糖类等的直接分析；荧光法具有较高的灵敏度，但是必须是待测物质本身可以发荧光，或者通过衍生技术使之成为具有荧光性质的物质才能进行分析测定；化学发光只适用于能够产生化学发光的反应体系。因此，如何应用一些新的技术作为无紫外-可见吸收、无荧光和化学发光体系的HPLC的新的检测手段，无疑对于HPLC技术的发展具有重要意义。.共振瑞利散射（RRS）是近年来发展起来的一种新的光谱分析技术。其具有高灵敏度的特征。RRS主要利用探针和目标分子反应过后引起分子体积、形貌、疏水性等的变化从而引起RRS信号的变化。近年来，RRS法在生化和药物分析中得到越来越多的应用。但是RRS法存在着选择性不高和多组分同时测定能力较弱的缺点，而且某些反应体系稳定性差，影响测定的精密度。因此，如能与其他分离技术相结合，特别是与HPLC相结合，对提高方法的选择性、多组分同时测定能力，提高方法的准确度和精密度具有重要意义，进一步扩大了RRS的分析应用领域，也是共振瑞利散射分析的重要发展方向。.本课题组改进、完善了HPLC-RRS联用的柱后衍生装置，在自行设计制作的柱后衍生装置中实现了反应管长、反应温度、衍生化试剂流速等条件的可控，并且采用了一个peek材质的蠕动泵，以增强装置的耐用性，该装置已经获得国家新型实用新型专利授权（专利号：ZL 2016200743456）。.本课题组利用设计制作的柱后衍生装置成功地应用于HPLC-RRS联用技术分离分析水环境中无紫外吸收的氨基糖苷类抗生素，局部麻醉药的分析，吲哚类生物碱的分析测定，精神类药物的测定，咪唑类广谱抗菌药的分析测定，α受体阻滞剂的分离分析，抗核酸代谢类药物的测定，氟喹诺酮类抗生素的测定。所取得的结果令人满意。.本课题组应用扫描电镜（SEM）、红外（IR）、量子化学计算等手段对RRS信号增强机理进行了探讨，发现在HPLC-RRS联用体系中，分子聚集体的形成是RRS信号增强的主要原因。.本课题组开展的HPLC-RRS联用技术相关工作，解决了同时测定无紫外、荧光信号或紫外荧光信号