米非司酮对小鼠植入窗期子宫内膜水通道蛋白1的调节及作用机制

Mifepristone is an antiprogestin which interacts with progesterone at the receptor level. Mifepristone was the first progesterone receptor (PR) antagonist approved for clinical use and has been used widely as an abortion drug. Currently, mifepristone is used as an emergency contraceptive drug, and it has been found recently that the dosage required for effective contraception is lower than originally suggested, thereby increasing both acceptability and continuation rates. However, the contraceptive mechanisms of mifepristone remain undetermined. AQP1 was most concentrated within the endometrium at the time of implantation, suggesting that AQP1 might play physiological roles in the uterine receptivity. In order to investigate the role of low dose mifepristone as an anti-implantation contraceptive drug, immunohistochemisty and real-time PCR were used to analyze the effects of low dose mifepristone on the expression levels of AQP1 in human endometrium at the time of implantation.

米非司酮（mifepristone,RU486）是人类合成的一种19-去甲类固醇，通过竞争性结合孕激素受体，在受体水平特异性阻断孕激素的作用，同时也能与糖皮质激素受体结合而起拮抗作用。目前米非司酮已广泛用于临床终止早期妊娠，也用于紧急避孕的临床研究。近年研究发现，在人子宫内膜中，水通道蛋白-1的表达具有周期性，在植入窗期表达明显增加，对正常妊娠的建立与维持具有重要的作用。因此，我们推测米非司酮可能通过对水通道蛋白-1表达的影响而发挥内膜避孕的作用。 就上述问题，采用体外实验，从细胞和分子水平，利用免疫组化法、real-time PCR、免疫印迹、渗透试验、血管生成试验等相关技术，进一步探讨低剂量米非司酮作为抗着床避孕药可能的机制，为新的避避径的开发以及人类的生殖过程中相关疾病的发生机理和治疗研究提供新的思路。

研究背景：研究发现，每日给予低剂量米非司酮能阻止内膜发育而起避孕作用，即所谓的“内膜避孕”，对月经周期影响少且无明显副作用。然而，低剂量米非司酮作为抗着床避孕药的机制仍不完全清楚。植入窗期子宫内膜间质血管生成及水肿变化将直接影响子宫内膜的容受性。近年研究发现，人子宫内膜中水通道蛋白-1(AQP1) 的表达具有周期性，在植入窗期表达明显增加，对正常妊娠的建立与维持具有重要的作用。因而米非司酮可能通过通过MAPK/AQP1路径调节子宫内膜血管功能，进而发挥其抗着床避孕的作用。主要研究内容：本研究目的是研究米非司酮对植入窗期小鼠子宫内膜组织AQP1表达，血管密度及间质水肿的影响；米非司酮对脐静脉血管内皮细胞AQP1表达，血管生成及渗透性的影响；MAPK信号途径在米非司酮对脐静脉血管内皮细胞AQP1表达及相关功能调节过程中的作用。结果：米非司酮能增加植入窗期子宫内膜微血管密度、AQP1蛋白及mRNA的表达，提示米非司酮可能以此破坏了人植入窗期子宫内膜微环境；米非司酮能明显增加脐静脉血管内皮细胞增值、血管生成及渗透性，提示米非司酮可能参与子宫内膜间质血管生成及水肿变化；MAPK信号通路在米非司酮发挥其作用的过程中发挥重要作用；AQP1siRNA处理前后低剂量米非司酮对微血管密度增值影响有明显差异，提示AQP1参与了低剂量米非司酮对血管生成的影响。结论：本研究进一步探讨低剂量米非司酮作为抗着床避孕药可能的免疫学机制，为新避孕途径的开发以及人类的生殖过程中相关疾病的发生机理和治疗研究提供新的思路。