着床丝氨酸蛋白酶2（ISP2）在小鼠胚胎着床中的作用

胚胎着床是哺乳动物和人类特有的一个生殖步骤，不仅是发展避孕节育新技术的理想靶环节，也是目前限制人工辅助生育技术成果率的关键环节。着床丝氨酸蛋白酶-2（ISP2）是本实验室以小鼠为模型筛选到的一种具有较高组织特异性的着床相关因子，在围着床期的胚胎着床位点特异性高表达，抗ISP2抗体，以及丝氨酸蛋白酶抑制剂AEBSF在小鼠体内能有效地抑制胚胎着床，提示ISP2在着床过程中发挥重要作用，是一种潜在的抗着床药物的靶分子。根据前期研究结果，我们推测ISP2可能是通过降解细胞外基质（ECM）而促进滋养层细胞对子宫内膜组织的附着和侵入过程。为了证实这一假设，本项目拟利用条件性基因敲除模型和小鼠囊胚-子宫内膜细胞共培养模型，在体和离体观察ISP2基因表达水平的变化对小鼠胚胎着床的影响，并检测母胎界面关键分子的变化情况，以期进一步揭示ISP2在胚胎着床中的作用机制。

胚胎着床是哺乳动物和人类特有的一个生殖步骤，不仅是发展避孕节育新技术的理想靶环节，也是目前限制人工辅助生育技术成功率的关键环节。着床丝氨酸蛋白酶-2（ISP2）是本实验室以小鼠为模型筛选到的一种具有较高组织特异性的着床相关因子，在围着床期的胚胎着床位点特异性高表达，抗ISP2抗体在小鼠体内能有效地抑制胚胎着床，提示ISP2可能在着床过程中发挥重要作用，是一种潜在的抗着床药物的靶分子。在本项目中，我们建立了ISP2基因敲除小鼠模型，并利用该模型发现ISP2基因剔除并不影响小鼠的胚胎着床和生育能力，因此推测存在可能的代偿途径。通过基因芯片等技术，我们发现ISP2的基因敲除能引起着床丝氨酸蛋白酶-1（ISP1）、丝氨酸蛋白酶抑制剂SERPINS以及G蛋白信号途径调节蛋白RGS2等基因表达改变。另外，丝氨酸蛋白酶抑制剂AEBSF不仅在小鼠囊胚-子宫内膜上皮细胞共培养模型中抑制小鼠囊胚粘附以及内膜细胞的生长，还在大鼠体内显著抑制胚胎着床。在研究胚胎着床的过程中，我们还发现富含半胱氨酸酸性分泌蛋白SAPRC在小鼠胚胎围着床期的子宫中呈现时空特异性表达，并在Matrigel Invasion实验中，降低SPARC基因的表达能够显著抑制绒毛膜滋养层细胞HTR8/SVneo的侵袭能力，提示SPARC在小鼠早期妊娠的胚胎着床中起着一定的作用。