dsRNA介导沉默抑制子基因的转基因加工番茄抗病毒研究

加工番茄为制酱专用番茄，是新疆农业继棉花之后的一个支柱产业。由于受病毒危害，产量及种植规模受到严重影响。本项目利用转录后基因沉默原理，通过在植物体内形成dsRNA沉默目标基因，分别构建含沉默抑制子CMV Δ2b基因、病毒复制酶基因CMV ΔRep以及它们分别与ToMV MP嵌合的反向重复的植物表达载体，以农杆菌介导转化加工番茄，通过分子检测获得抗性再生植株，测定转基因植物对相应病毒的抗性水平和抗感比率；检测分析攻毒前后21-23nt小RNA存在、含量与抗性的关系，比较病毒的沉默抑制子基因与其它蛋白基因诱导的抗病性差异，探索dsRNA介导的抗病毒机理；对转基因植物后代进行抗性筛选和遗传分析，获得遗传稳定的抗病毒转基因植物。项目的完成可望同时获得抗2种病毒的转基因加工番茄，并为全面解析沉默抑制子功能及沉默机制提供科学依据。