miR-125b通过SGPL1调控IL-8表达的机制及其在子痫前期发病中的作用研究

Preeclampsia (PE) ,a gestational-specific syndrome, is the leading cause of maternal and fatal morbidity and mortality. miRNAs have been intensely studies in the pathogenesis of PE. However, what roles miRNAs played in vivo is unclear. We found that miR-125b was significantly elevated in both placenta and circulation. Our observations indicated that miR-125b may increased IL-8 expression via directly targeting SGPL1, although further investigations were needed. We would transfect pregnant mice with miR-125b agomir and test whether miR-125b could increased IL-8 expression and play roles in the pathogenesis of preeclampsia. We would then validate the directly targeting effect of miR-125b on SGPL1 by Luciferase assay, and further investigate the underlying mediating effect of SGPL1 in the regulation of IL-8 by miR-125b via co-transfecting trophoblast cells with miR-125b and SGPL1 overexpression vector. We would further overexpress SGPL1 in miR-125b-transfected mice to uncover the roles of miR-125b-SGPL1-IL-8 pathways in vivo. Based on the above results, we would clarify the underlying mechanisms of miR-125b in the regulation of IL-8 by targeting SGPL1, and would elucidate the roles of miR-125b in the pathology of PE. Our investigations could facilitate our insights about PE and the development of alternative intervals.

子痫前期(preeclampsia, PE)是严重危害母婴健康的妊娠期综合征，miRNAs参与PE发病的现象日益引起重视，但对miRNAs的在体作用情况还不清楚。申请者的前期研究发现，PE患者中miR-125b表达异常，初步研究提示miR-125b可能通过SGPL1上调IL-8的表达。申请者将建立体内miR-125b转染孕鼠模型，结合细胞与临床工作，研究miR-125b对IL-8的调控及其在子痫前期发病中的作用；采用Luciferase验证miR-125b对SGPL1的靶标作用，共转染miR-125b与SGPL1过表达载体入细胞，研究miR-125b通过SGPL1调控IL-8表达的机制；建立miR-125b与SGPL1共转染动物模型，研究在体SGPL1对IL-8的调控。本研究将阐明miR-125b通过SGPL1上调IL-8表达的机理及其在PE发病过程的作用，为PE干预提供理论和实验依据。

子痫前期(preeclampsia, PE)是由胎盘功能障碍引发的全身性多因素多系统参与的妊娠期综合征，胎盘滋养层细胞功能受损，滋养层细胞侵润不足，胎盘缺血缺氧，向母体释放可溶性因子，母体多器官损伤，是PE发病的主要原因。miRNAs是在真核生物中发现的一类内源性的调控基因转录后表达的非编码小RNA，miRNAs的差异表达与子痫前期疾病发生密切相关，对miRNAs在胎盘发育和子痫前期发病中的作用通路和机制研究将为疾病的早期预测和临床干预提供重要的分子靶标。申请者的前期研究发现，PE患者miR-125b表达异常，miR-125b可能通过SGPL1上调IL-8的表达，然而其在PE中的作用和机制还不清楚。我们推测miR-125b可能通过SGPL1等靶基因调控滋养层细胞侵润和IL-8的表达，参与子痫前期疾病的发生发展。我们从三个层次开展研究：1采用病例对照研究，分析正常妊娠产妇和PE患者体内miR-125b及其靶向分子表达、细胞因子IL-8等表达特点；2采用体外细胞培养、转染、RNAi技术和luciferase assay，上调/下调miR-125b及其靶向分子，探究miR-125b对滋养层细胞IL-8表达及其对滋养层细胞生物学行为的影响；验证miR-125b与靶基因的靶向关系及其在miR-125b功能调控中的作用。3构建miR-125b转染孕鼠，比较miR-125b转染孕鼠与对照孕鼠子痫前期疾病相关症状的发病情况。研究发现，1PE患者胎盘局部和血浆中miR-125b表达较正常产妇胎盘局部表达显著升高，PE患者孕早期血浆miR-125b水平显著升高，提示miR-125b上调与子痫前期疾病发生密切相关，PE患者miR-125b高表达可作为子痫前期疾病发生的预测因子。2细胞实验表明SGPL1和KCNA1是miR-125b在滋养层细胞中的靶标基因；miR-125b通过靶向SGPL1基因上调IL-8的表达分泌，通过靶向抑制KCNA1抑制滋养层细胞侵润。3在体研究发现黄酮类化合物参与miRNAs异常表达的上游调控，quercetin有效改善子痫前期大鼠模型的表型与妊娠结局。研究表明，PE患者miR-125b表达上调抑制滋养层细胞侵润，细胞因子IL-8表达上调，胎盘功能障碍，诱发PE疾病的发生。本项目为PE的发病机制研究、子痫前期的预防及治疗提供新的思路