耻垢分枝杆菌中c-di-GMP受体转录因子Ms5860的功能及其调控细菌抗氧化胁迫的分子机制研究

基本信息
批准号:31401108
项目类别:青年科学基金项目
资助金额:24.00
负责人:李伟辉
学科分类:
依托单位:华中农业大学
批准年份:2014
结题年份:2017
起止时间:2015-01-01 - 2017-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:黄凤,崔涛,胡利华,忽清斌,刘慧聪,王梓晴
关键词:
氧化胁迫耻垢分枝杆菌结核分枝杆菌cdiGMP受体
结项摘要

Mycobacterium tuberculosis encounters oxidative stress environments when it lives in the infected host. So, it evolved a set of antioxidant regulatory mechanisms. However, these mechanisms are poorly undersood. To address this issue, we will systematically identify the function and signaling pathway of c-di-GMP responding regulator Ms5860 in model organism Mycobacterium smegmatis based on previous works. Then, we will reveal the antioxidant mechanism of Ms5860 involved in mycobacteria. Firstly, we will identify the Ms5860 interaction with c-di-GMP specially through the UV crosslinking assay. Then, we will analyze the influence of c-di-GMP for Ms5860 transcriptional regulation by EMSA, qRT-PCR assays and so on. Finally, we will explore the pathway of Ms5860 responsing to oxidative stress by comparing the growth of Ms5860 knockout with overexpression strains as well as high and low concentrations of c-di-GMP strains. These works will provide important clues for further clarifing the antioxidant regulatory mechanisms of Mycobacterium tuberculosis.

结核分枝杆菌在感染的宿主体内必须面对许多氧化胁迫环境因子,因而进化形成了一套自己的抗氧化调控机制。然而,目前对于这些机制却知之甚少。针对这一科学问题,本项目基于前期的工作基础,以耻垢分枝杆菌为模式菌株,通过系统鉴定一个直接应答第二信使c-di-GMP信号的转录因子Ms5860的功能和相关信号通路,揭示其参与调控分枝杆菌抗氧化胁迫能力的分子机制。首先,通过紫外交联的方法分析Ms5860与c-di-GMP的特异性相互作用。然后,通过EMSA、qRT-PCR等体内外实验方法分析c-di-GMP对Ms5860转录调控的影响。最后,通过构建重组菌株,比较分析Ms5860敲除菌株、超表达菌株以及含高、低浓度c-di-GMP菌株在氧化胁迫条件下的生长差异,探讨Ms5860应答氧化胁迫的信号途径。这些工作将为进一步阐明结核分枝杆菌抗氧化调控的分子机制提供重要线索。

项目摘要

结核分枝杆菌在感染的宿主体内必须面对许多氧化胁迫环境因子,因而进化形成了一套自己的抗氧化调控机制。然而,目前对于这些机制却知之甚少。针对这一科学问题,本项目基于前期的工作基础,以耻垢分枝杆菌为模式菌株,通过系统鉴定一个直接应答第二信使c-di-GMP信号的转录因子Ms5860的功能和相关信号通路,揭示其参与调控分枝杆菌抗氧化胁迫能力的分子机制。首先,通过紫外交联的方法分析Ms5860与c-di-GMP的特异性相互作用。然后,通过EMSA、qRT-PCR等体内外实验方法分析c-di-GMP对Ms5860转录调控的影响。最后,通过构建重组菌株,比较分析Ms5860敲除菌株、超表达菌株以及含高、低浓度c-di-GMP菌株在氧化胁迫条件下的生长差异,探讨Ms5860应答氧化胁迫的信号途径。这些工作将为进一步阐明结核分枝杆菌抗氧化调控的分子机制提供重要线索。

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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