肾上腺内源性RGS信号转导通路对醛固酮合成的调控机制

原发性醛固酮增多症是继发性高血压最常见的原因。由于大部分患者为特发性醛固酮增多症，目前的治疗效果不理想。因此，深入了解调控醛固酮合成和分泌的分子机制，寻找更有效的治疗措施，是今后研究的重点。G蛋白信号调节因子RGS2和RGS4是肾上腺皮质球状带特异表达、调控醛固酮合成和分泌的关键因子。本研究应用慢病毒载体，设计针对RGS2和RGS4的mRNA序列，在人肾上腺皮质源性H295R细胞系及大鼠肾上腺过度表达RGS2和RGS4或通过RNA干扰下调RGS2和RGS4。在低盐、高盐或Ang II的刺激下，了解下游信号分子的表达及功能变化情况，了解醛固酮的分泌情况。应用全细胞膜片钳检测H295R细胞的钾电流和钙电流，免疫荧光和蛋白印迹技术检测钾通道和钙通道蛋白的表达情况，了解低表达和过度表达RGS2和RGS4如何调节H295R细胞钾通道和钙通道的功能及醛固酮的合成和分泌。

原发性醛固酮增多症（primary aldosteronism, PA）是引起继发性高血压最常见的原因，主要包括肾上腺醛固酮腺瘤和特发性醛固酮增多症等。其中醛固酮腺瘤的部分患者可通过手术根治，而特发性醛固酮增多症的患者大多需要药物治疗才可在一定程度上控制高血压，但其降压效果有待进一步研究和改善。因此，深入了解肾上腺皮质合成和分泌醛固酮的信号转导通路，对于阐明特发性醛固酮增多症的发病机制和开发位于信号通路上游的高选择性的药物具有重大意义，是今后研究的重点方向。本研究中，我们应用设计的针对人G蛋白信号调节因子RGS2的mRNA序列的慢病毒载体，在人肾上腺皮质癌（H295R）细胞系过度表达RGS2以及通过RNA干扰下调RGS2，研究了在血管紧张素II（AngII）的刺激下，RGS2不同表达水平的H295R细胞分泌醛固酮量的情况，并评估p38MAPK信号通路和CAMK II信号通路在血管紧张素II介导H295R细胞分泌醛固酮过程中的作用。研究结果表明，RGS2过表达能显著降低AngII刺激下H295R细胞分泌的醛固酮量，p38MAPK和CAMK II信号通路均参与调控肾上腺皮质细胞内源性RGS信号通路介导的醛固酮的合成和分泌过程。这一研究结果对进一步开发针对特发性醛固酮增多症的特异性高选择药物具有重要意义。