牛卵母细胞成熟过程中凋亡机制研究

本研究以牛卵丘－卵母复合体为研究对象，以体外受精技术为基础，采用核型分析、皮质颗粒染色、Annexin-V染色、细胞色素C免疫定位、TUNEL、免疫细胞化学、蛋白电泳、实时定量PCR、抗体注射等检测技术，通过建立卵丘-卵母细胞复合体形态与卵母细胞质量的相关性体系，系统地研究牛卵母细胞与卵丘细胞在体外成熟过程中的凋亡机制、凋亡对卵子受精后发育潜力的影响以及与发育潜力相关的凋亡关键基因的表达和调控。主要从细胞凋亡发生的三个阶段（早期、中期、晚期）与分子水平上了解牛卵母细胞中可能存在的凋亡倾向及其对卵母细胞发育潜力的影响，对凋亡信号通路中促凋亡基因、抑制凋亡基因、死亡受体及其配体基因的表达产物进行胞内定位与定量表达研究。在此基础上，通过对凋亡关键基因的表达调控了解其对牛卵母细胞发育潜力的影响。本研究将为牛卵母细胞凋亡机理研究提供基础理论依据，促进相关哺乳动物胚胎工程技术在畜牧业的发展和应用。