基于A20基因为药物靶的新型跨膜人工锌指肽分子设计

A20基因在器官移植、动脉粥样硬化、心肌肥大、严重损伤等方面具有广泛的作用。以A20基因作为药物靶基因具有广泛的应用前景。分析A20基因序列，设计能与A20基因启动子区18bp序列结合的6个锌指基序，位点选择性亲和凝胶电泳筛选亲和性最好的锌指蛋白，将人工合成的锌指蛋白融合到NF-κB的亚单位P65的功能区(位于第288-548之间氨基酸序列)，再在合成的转录因子N-末端加上一段Tat（48-60，GRKKRRQRRRPPQb）蛋白穿膜序列。构建的人工转录蛋白克隆到相应真核表达载体在真核细胞进行表达，抽提纯化活性蛋白，观察活性蛋白穿膜效果及促进细胞内A20基因表达程度。本课题的研究完成可望获得一种具有知识产权，在器官移植及动脉粥样硬化治疗中具有重要功能的新型大分子药物。