清肺通络方调控NLRP3炎症小体对肺炎支原体肺炎的疗效机制研究

Mycoplasma pneumoniae (MP) is one of the main pathogens of pneumonia in children,because it is easy to cause immune function disorder and antibiotic resistance,resulting in protracted illness or recurrent.This project based on the "lung collaterals" theory with Qingfei Tongluo Decoction in treating mycoplasma pneumonia (MPP)and ccurative effect is remarkable.Previous studies found that Qingfei Tongluo Decoction can reduce inflammatory cytokines, reduce tissue injury.This project is intended to be combined in vivo, in vitro and in clinical trials,NLRP3 inflammatory body as the main line,multi level exploration the inhibition mechanism of Qingfei Decoction by regulating NLRP3 inflammasome, inhibited caspase-1 activation, reduced IL-1 and IL-18 inflammatory cytokine release, reduce inflammation and apoptosis.To further verify the clinical curative effect of Qingfei Tongluo Decoction in the treatment of MPP, to provide new clues for the clinical treatment of traditional Chinese medicine MPP.

肺炎支原体（MP）是小儿社区获得性肺炎的主要病原之一，因其易引起免疫功能紊乱及抗生素耐药，导致疾病迁延不愈或反复发作。本项目组基于“肺络”理论自拟清肺通络方治疗肺炎支原体肺炎（MPP）疗效显著。既往研究发现，清肺通络方可下调炎性细胞因子，减轻组织损伤。本项目拟通过体内、体外、临床试验相结合，以NLRP3炎症小体为主线，多层面探索清肺通络方通过调控NLRP3炎症小体，抑制Caspase-1活化，减少IL-1β、IL-18炎性细胞因子释放，减轻炎症反应，并抑制细胞凋亡的作用机制。进一步验证清肺通络方治疗MPP的临床疗效，为临床开展中医药治疗MPP提供新线索。

项目背景 肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）是当代儿童常见呼吸道感染病原体之一。随着大环内酯类抗生素的广泛使用，MP对其的耐药菌株逐渐增多，重症MPP的发生率和耐药菌株的增加使临床治疗难度加大，寻找新的治疗药物迫在眉睫。研究内容 研究MP在体外感染A549细胞后，诱导NLRP3炎症小体引起的炎症反应与NLRP3炎症小体对A549细胞凋亡的调控作用，探讨清肺通络方(QTF)对NLRP3、ASC的调节及IL-18、IL-1β的干预作用。重要结果 （1）MP感染A549细胞，激活NLRP3炎症小体，使NLRP3、ASC、caspase-1、IL-18、IL-1β表达水平上升，导致A549细胞凋亡率上升；（2）QTF水提物可抑制被MP感染后所激活的NLRP3炎症小体，使NLRP3、ASC、caspase-1表达量下降，下调IL-18、IL-1β表达水平及A549细胞凋亡率，且浓度越高保护及抑制作用更明显；（3）QTF可以抑制被MP感染所激活的BALB/c小鼠肺组织NLRP3炎症小体，使NLRP3、ASC、caspase-1表达量下降，降低IL-18、IL-1β表达水平，且中西医结合组显著优于单纯中药组、西药组。（4）QTF能够有效抑制MP小鼠体内NOS、iNOS活力，减少NO、MDA含量，使SOD活力升高，有一定的抗氧化作用；（5）QTF能够降低MPP患儿体内炎症因子IL-18表达水平，使MDA下降，SOD上升，发挥体内抗氧化作用，减少肺部炎症的损害。科学意义 QTF通过调控NLRP3炎症小体，减少MP感染后炎症反应，抑制细胞凋亡作用研究是本项目的关键。观察QTF调控NLRP3炎症小体表达与减少炎性细胞因子释放、抑制细胞凋亡功效、减少体内氧化应激发生的相关性。以NLRP3炎症小体相关指标的调控作用为主线，体内、体外、临床三位一体，进一步验证实验结果的可靠性。