基于TGF-β/Smad3的抗青光眼术后滤过道瘢痕化中药筛选体系的建立及验证

The main reason of glaucoma operation failure is filtrate passageway scarring.Now drugs of anti- scarring of filtrate passageway have serious side effects and people urgently need innovative drugs. High throughput screening system has gradually become the main method of drug screening. Point of the establishment of screening system is drug targets. The key drug targets of filtrate passageway scarring are TGF-beta/Smad3protein (molecular targets) and TCFS (cell target). From these, the use of genetic engineering and genetically modified technology, high-throughput screening system of anti-scarring 0f filtrate passageway is established. Successful establishment of system provides the key common technology for drug screening of anti-scarring of filtrate passageway, and using the system for high-throughput screening of traditional Chinese medicine, in favor of research and development of new drug. .Early study shows QingGuangAn, traditional Chinese medicine, has suppression for filtrate passageway scarring. In order to verify the screening system that is established, the research will prepare component into group to screen effective components of anti-scarring of filtrate passageway.

青光眼手术失败的最主要原因是术后滤过道瘢痕化，目前抗滤过道瘢痕化药物的副作用多且严重，亟需创新药物出现。高通量筛选体系已逐渐成为药物筛选的主要方法。筛选体系建立的要点在于药靶。滤过道瘢痕化的关键药靶是TGF-β/Smad3蛋白（分子靶标）和TCFS（细胞靶标）。本研究从此入手，采用基因工程技术和转基因技术，建立抗滤过道瘢痕化的高通量筛选体系。体系成功建立，将为抗滤过道瘢痕化的药物筛选提供关键共性技术，利用该体系对中药组分库进行高通量筛选，有利于新药的研发。.前期研究表明中药青光安具有抑制滤过道瘢痕化的作用。为了验证所建立的筛选体系，本研究将制备青光安中药组分库，利用该体系进行抗滤过道瘢痕化的青光安有效组分筛选，并将最优的筛选结果进行滤过手术动物模型验证。若验证成功，不仅能证明所建立的筛选体系的实用性，也能找出青光安抗滤过道瘢痕化的有效组分，有助于创新药物的发现。

青光眼滤过性手术失败最主要原因是术后滤过道瘢痕化。目前已有的抗滤过道瘢痕化的药物副作用多且严重。本项目前期研究表明中药青光安具有抑制滤过道瘢痕化的作用。为了筛选出青光安抗滤过道瘢痕化的有效组份，本项目成功的建立了基于TGF-β/Smad3信号传道系统的抗青光眼术后滤过道瘢痕化的中药高通量筛选体系。并对青光安进行了筛选，从中筛选出56种有效组份，建立了青光安有效组份库。经过多次反复筛选，我们从56种青光安有效组份中筛选出了4种最优有效组份。通过观察青光安有效组份对抗青光眼术后滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路、成纤维细胞、Ⅰ型胶原蛋白、MMP-7、TIMP-1等指标，我们发现青光安有效组份2为最优组份。与丝裂霉素C（MMC）相比较，具有相类似的抗滤过道瘢痕作用，但副作用更小。我们通过改变青光安有效组份2的剂型及给药方式，发现青光安具有良好的安全性，在实验过程中未发现明显的毒副作用，安全性优于MMC。.本项目共培养研究生8名（博士研究生3人，硕士研究生5人），共发表论文 24篇，国内外学术会议交流论文 9篇。该项目先后申请国家发明专利一项，获2014年中华中医药学会科学技术奖二等奖1项和湖南省优秀硕士学位论文1篇，《中医诊治青光眼的系列研究及应用》通过专家鉴定，居国内外同类研究的领先地位，并获湖南省科技成果登记证书。