CDK5/p35-PIKE-A通路在非小细胞肺癌血管生成拟态中的作用机制研究

血管生成拟态(VM)是一种全新的肿瘤内血管生成模式，与经典抗血管生成疗效不佳密切相关。肿瘤细胞可塑性是VM形成的基础，CDK5作为神经元可塑性的关键因子，是否在肿瘤细胞重塑和VM过程中发挥调控作用尚未明确。PIKE-A是一组GTP结合蛋白，参与细胞骨架形成及细胞重塑，与肿瘤侵袭行为有关；CDK5可通过磷酸化PIKE-A而激活PIKE-A/Akt通路，从而介导肿瘤的侵袭和转移。我们前期工作中发现非小细胞肺癌(NSCLC)组织中CDK5/p35表达增高，并与其VM形成呈正相关；肺癌A549细胞中PIKE-A蛋白表达也明显增高。鉴于以上因素，我们推测：CDK5可能磷酸化PIKE-A激活PIKE-A/Akt通路，通过调节肿瘤细胞的可塑性而在肺癌VM形成过程中发挥重要作用；采用siRNA技术靶向调控NSCLC中CDK5/PIKE-A通路，降低肿瘤细胞的可塑性，有望阻断VM血供模式、遏制肺癌细胞生长。

本研究采用小管形成、Transwell、Western Blot、免疫组化、MTT等方法，研究CDK5在非小细胞肺癌血管拟态（VM）生成中的作用。主要成果表现在以下几个方面:（1）体内外实验证实非小细胞肺癌中存在血管拟态这种特殊的血管生成方式。（2）体内外实验证实CDK5在肺癌血管拟态生成中发挥重要作用，靶向抑制CDK5能够减少A549细胞肺癌血管拟态的形成，同时靶向抑制CDK5可降低肺癌A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力，破坏细胞骨架稳定性。（3）体内外实验证实CDK5是通过调控下游FAK/AKT通路影响肺癌A549细胞的血管拟态形成。靶向抑制FAK能够减少A549细胞肺癌血管拟态的形成，靶向抑制FAK可以下调细胞侵袭迁移能力 ；破坏细胞骨架稳定性 ；下调MMP-2的表达。上述结果证实了我们提出的假说，CDK5通过磷酸化激活FAK/AKT调节肿瘤细胞的可塑性从而在肺癌VM的形成过程中发挥重要作用，靶向调控非小细胞肺癌中CDK5/FAK/Akt通路，降低肿瘤细胞的可塑性，有望阻断VM血供模式、遏制肺癌细胞生长。