基于冠心病痰证理论探讨经典方剂温胆汤的体内药效物质和抗动脉粥样硬化作用机制

As the pathological foundation and the key link in many cardiovascular diseases, prevention and treatment of atherosclerosis has become a major issue with common concern in the world. According to the theory of traditional Chinese medicine, phlegm turbidity is the foundation of atherosclerotic lesion formation. Throughout history, experts in Chinese medicine emphasized that treatment of phlegm is one of the important ways in treatment of coronary heart disease. Wendan Decoction was first showed in the Tang dynasty and widely used in clinical treatment of phlegm syndrome. This study is aim to reveal in vivo effective components of Wendan Decoction by using UPLC-Q-TOF/MS technology. This study is also designed to explore the role of RCT and angiogenesis in atherosclerosis plaque in the anti-atherosclerotic effects of Wendan Decoction and the underlying mechanism by establishing cell and mouse models related with phlegm syndrome in TCM of coronary heart disease. The study will not only provide more comprehensive scientific experimental evidence for clinical application of Wendan Decoction, but also provide foundation for further development of anti-atherosclerotic Chinese medicine which has clear target and material base.

动脉粥样硬化作为众多心血管疾病发生的病理基础和关键环节，其防治已成为全世界共同关注的重大课题。中医学认为，痰浊阻络是AS病变形成的基础。从古到今，中医大家都强调从痰论治是治疗冠心病的重要途径之一。温胆汤是出自《千金要方》，经宋朝陈言在《三因方》调整，具有理气化痰、温胆和胃之功效，能够同时治疗有形之痰与无形之痰，调节枢机不利，调理肝、胆、脾、胃，五脏相关，历经千年而不衰，具有广泛的临床应用价值。本研究以中医冠心病痰证理论为基础，结合中西医学研究进展，借助现代科学理念和先进技术，采用UPLC-Q-TOF/MS技术，揭示温胆汤体内药效成分，并构建冠心病痰证相关细胞和动物模型，从胆固醇逆转运和斑块内血管新生两个角度探讨经典方温胆汤治疗动脉粥样硬化的作用机制。本研究旨在为温胆汤的临床应用提供更全面的科学实验依据，也为进一步开发靶点明确、物质基础清晰的具有抗动脉粥样硬化作用的中药新制剂奠定基础。

动脉粥样硬化（AS）是众多心血管疾病发生的病理基础和关键环节，中医学认为痰浊阻络是AS病变形成的基础，从痰论治是治疗冠心病的重要途径之一。温胆汤（WD）具有理气化痰、温胆和胃之功，能够同时治疗有形之痰与无形之痰，具有广泛的临床应用价值。本研究以中医冠心病痰证理论为基础，采用UPLC-Q-TOF/MS技术揭示WD体内药效成分，并构建冠心病痰证相关细胞和动物模型，从胆固醇逆转运和斑块内血管新生两个角度探讨WD治疗AS的作用机制。研究对WD化学成分以及体内外源物进行了检识和分析，初步筛选WD可能的药效成分单体。药效作用机制方面，WD抑制巨噬细胞泡沫化，减少细胞内总胆固醇、胆固醇酯水平和胆固醇酯化率，并提高胆固醇流出率，其机制可能与降低巨噬细胞SR-A、CD36蛋白和提高ABCA1、SR-BI蛋白水平有关；WD药效成分单体柚皮素、橙皮素、橙皮内酯均抑制泡沫细胞形成，减少细胞内总胆固醇、胆固醇酯水平和胆固醇酯化率，并提高胆固醇流出率，柚皮素的药效机制可能涉及减少巨噬细胞SR-A蛋白和增加ABCA1蛋白水平，橙皮素的药效机制可能涉及减少巨噬细胞SR-A蛋白和增加ABCA1、SR-BI蛋白水平，橙皮内酯的药效机制可能涉及增加ABCA1、SR-BI蛋白水平。WD抑制内皮细胞成管和细胞粘附数量，其机制可能与WD减少VEGF-A、p-BMX蛋白和增加ANGPT-1蛋白水平有关，但WD对内皮细胞的迁移无明显药效作用，且WD升高了内皮细胞ICAM-1、VCAM-1、p-P65、p-p38MAPK和p-Erk1/2的蛋白水平。WD降低ApoE-/-小鼠血清TG、TC、LDL-C、ox-LDL，减少主动脉斑块面积，减少斑块内巨噬细胞数量、MMP-9水平、滋养血管生成，减少主动脉出芽数量，其机制可能涉及减少斑块内p-Bmx、p-p65、p-JNK、p-p38MAPK、p-Erk1/2蛋白水平，减少主动脉VEGF-A、ANGPT-2蛋白和增加ANGPT-1蛋白水平，增加主动脉ABCA1蛋白水平，增加肝脏SR-BI蛋白水平。本研究初步揭示了温胆汤的药效物质成分及其抗AS的作用机制，为温胆汤的临床应用提供更全面的科学实验依据，也为进一步开发靶点明确、物质基础清晰的具有抗AS作用的中药新制剂奠定基础。