Kazal型抑制因子在对虾免疫应答过程中的作用研究

丝氨酸蛋白酶抑制剂（SPI）是重要的非特异性免疫因子，在生物体免疫应答过程（如：凝结作用、酚氧化酶原级联反应、细胞因子活化等）中发挥着重要作用，对它的研究已成为先天免疫学的研究热点。对虾是我国的主要经济甲壳动物，对其SPI在免疫应答过程中的作用研究，不仅可为阐明甲壳动物的免疫应答机制提供有价值的参考，也为控制对虾病害打下基础，具有潜在的应用价值。我们在中国明对虾中首次克隆到一种新的SPI基因（Fc-Kazal），并证实其在转录水平参与免疫应答。本项目拟进一步分析其在翻译水平对病原刺激的应答模式；验证其对靶蛋白酶和病原菌的抑制选择性及抑制活性；在此基础上，利用基因过量表达和基因沉默技术，探讨该基因如何作为分子开关，通过调节酚氧化酶原激活途径中的关键靶酶，实现对该重要免疫应答途径的调控；从转录、翻译和表型水平系统阐述Fc-Kazal参与对虾免疫应答过程的分子机理，为深入研究其调控机制奠定基础。

丝氨酸蛋白酶抑制剂（SPI）是重要的非特异性免疫因子，在生物体免疫应答过程（如：凝结作用、酚氧化酶原级联反应、细胞因子活化等）中发挥着重要作用，对它的研究已成为先天免疫学的研究热点。对虾是我国的主要经济甲壳动物，对其SPI在免疫应答过程中的作用研究，不仅可为阐明甲壳动物的免疫应答机制提供有价值的参考，也为控制对虾病害打下基础，具有潜在的应用价值。我们在中国明对虾中首次克隆到一种新的SPI基因（Fc-Kazal），并证实其在转录水平参与免疫应答。本项目在利用原核重组表达获得rFc-Kazal的基础上，验证了重组目的（rFc-Kazal）蛋白对靶蛋白酶和病原菌的抑制选择性及抑制活性；制备了其多克隆抗体，分析了其在翻译水平对病原刺激的应答模式；研究了rFc-Kazal对白斑杆状病毒（WSSV）复制的抑制功能；利用基因过量表达和基因沉默技术，初步探讨该基因如何作为分子开关，通过调节酚氧化酶原激活途径中的关键靶酶，实现对该重要免疫应答途径的调控。研究工作从转录、翻译和表型水平系统阐述了Fc-Kazal参与对虾免疫应答过程的分子机理，为深入研究其调控机制奠定了基础。