DEK通过上调Six1/Ezrin信号通路相关蛋白促进宫颈癌演进

It has been proved that HPV is highly related with the mRNA transcription of proto-oncogene DEK, and it plays an important role in the occurrence and development of uterine cervical cancers, however, the molecular mechanism is still unclear. We previously found that homeobox gene Six1 and its downstream cell adhesion protein Ezrin are overexpressed in cervical cancer cells, and it can lead to metastasis of cervical cancer by promoting epithelial-mesenchymal transition (EMT); DEK- Six1/Ezrin co-expression are also found by immune double fluorescence staining in cervical cancer cells, suggesting that DEK may promote the progress of cervical cancer by regulating the protein expression of Six1/Ezrin. This study intends to confirm the biomarker value of DEK and Six1/Ezrin on evaluation of cervical cancer diagnosis and prognosis by using gene chip and protein expression detection combined with the detailed clinical data analysis, to analyze the effects and mechanism of DEK on regulation of Six1/Ezrin by silencing DEK expression in cervical cancer cell lines via RNAi technique, and to establish the nude mice tumor model bearing cervical cancer cells for confirming the effects of DEK on the tumorigenesis and EMT of cervical cancers and the regulation mechanism of gene expression. This study will elucidate the molecular regulating mechanism of DEK on promoting the tumorigenesis and metastasis, and provide new tumor markers and therapeutic targets for cervical cancers.

已证实HPV与癌基因DEK mRNA转录密切相关，在宫颈癌发生发展中有重要作用，但其机制尚不清楚。我们前期研究发现：同源盒基因蛋白Six1及其下游细胞粘附蛋白Ezrin可通过促进上皮-间质转化（EMT）导致宫颈癌转移；免疫双荧光研究发现DEK-Six1/Ezrin共同过表达于癌细胞内，提示DEK可能通过调节Six1/Ezrin蛋白表达促进肿瘤发生。本研究拟应用蛋白表达分析和芯片检测等技术，探讨DEK基因和Six1/Ezrin信号通路间的基因表达调控关系，明确其作为宫颈癌诊断及预后评估标志物的价值；体外应用RNAi技术特异性沉默宫颈癌细胞DEK表达，分析其对Six1/Ezrin信号通路基因表达及侵袭能力的影响；建立裸鼠宫颈癌模型，证实DEK通过上调Six1/Ezrin信号通路引发EMT导致肿瘤演进。本研究将阐明DEK促进宫颈癌发生及转移的分子调控机制，可为宫颈癌提供新的肿瘤标志物及治疗靶点。

已证实HPV与癌基因DEK mRNA转录密切相关，在宫颈癌发生发展中有重要作用，但其机制尚不清楚。因此，本研究重在阐明DEK促进宫颈癌发生及转移的分子调控机制，以期为宫颈癌提供新的肿瘤分子标志物及治疗靶点。. 研究主要应用基因芯片、免疫组化、PCR及基因测序等生物学技术，通过体内外功能获得及功能缺失实验，较为深入地研究了DEK、Ezrin/Six1在宫颈癌中的作用及机制，明确其直接调控靶基因和蛋白，为子宫颈癌的预后评估和侵袭转移控制提供新的标志物和治疗靶点。因此，我们在项目进展过程中扩展了研究对象，应用免疫组化、流式细胞仪、Real-time PCR、Western blot、基因转染和MTT实验等方法深入研究了DEK、Ezrin/Six1基因在宫颈癌演进过程中的作用以及其与DEK/Ezrin等其它因子之间的相互关系，得出了有意义的研究结果。简要总结如下：（1）Ezrin、HBXIP蛋白在宫颈癌组织中过表达，其过表达与肿瘤患者的预后关系密切；NQO1蛋白在多种恶性肿瘤组织中呈高表达，且其高表达提示肿瘤患者的不良预后。（2）Ezirn沉默通过EMT途径抑制宫颈癌细胞的迁移、浸润；DEK可促进结肠癌的增殖，并可能成为结肠癌治疗的新靶点。（3）BEZ235与TSA联合靶向治疗在乳腺癌和非小细胞肺癌中具有更显著的抗肿瘤作用。（4）建立了延边地区肿瘤组织库，其中宫颈癌的组织和血液样本是主要的资源储存。在项目进展期间，共发表了标注‘国家自然科学基金资助’的SCI论文11篇，核心期刊论文6篇，培养毕业5名博士生和4名硕士生。在项目负责人的前1项（30960120）以及本项（61371067）国家自然科学基金的资助下获得了1项吉林省科技进步二等奖（ARF/p53相关基因在上皮性肿瘤预后评估中的标志物作用及应用）。