补肾宁心方对调节性T细胞－成骨细胞－破骨细胞环路的调控作用

传统的激素替代疗法未能有效防治绝经后骨质疏松症(PMO)。本研究应用临床疗效确切的补肾宁心方灌服PMO模型小鼠，观察复方在体内对Treg细胞特征性分子及功能的调控。通过构建Treg细胞与成骨细胞和破骨细胞前体细胞（BMMs）的体外共培养体系(以Transwell隔开或直接接触共培养)；并分别干预PLC、PKC、PI3K或MEK1/2信号途径，分析药物血清对Treg细胞与成骨细胞和破骨细胞间交叉对话的调控机制及信号通路。富集灌服中药的去势鼠脾脏Treg细胞，利用RNAi技术使Treg中关键基因Foxp3沉默，或阻断Treg特异性表达的CTLA-4、TGFβ及IL-10,与成骨细胞及破骨细胞共培养，观察其对成骨细胞、破骨细胞的调控作用，以解析补肾宁心方作用于Treg细胞经细胞间直接接触调控骨代谢的分子机制。从骨免疫学角度解析补肾宁心方防治PMO的药效机制，从而深化中医药药物归经理论的分子基础。