人肺泡表面活性物质结合蛋白A基因在酵母中的表达

采用RT-PCR方法克隆正常中国人SP-AI基因,与国外报道其他人种SP-A基因比较存在中国人特异性亚型.经试验多个表达系统,将SP-A1基因分别克隆至载体pGEX-2T\pVT105U/α、pPIC9、转化至大肠杆菌BL21（DE3）、酿酒酵母S-78、毕加酵母GS115和KM71中，均能表达出目的蛋白质。原核表达的52kDa融合蛋白有良好的兔疫原性和免疫反应性；重组S-78分泌表达32kDa和64kDa条带，表达量为800mg/L；重组GS115和KM71表达出34kDa条带，表达量1.0g/L。经Western blot证实均为目的蛋白质。采用Sephdex和Sepharose层析、离子交换柱纯纯化的SP、A1有抑制肺II型细胞分泌磷脂的功能和促进SP-B、SP-C降低表面张力的活性；无动物急性毒性作用。