脾虚证相关基因在IEC-6细胞及小鼠模型的生物功能鉴定

前期芯片研究发现脾虚证差异表达基因，本项目选择其中5条经过荧光定量PCR验证的基因进行功能鉴定。采用IEC-6细胞作为模型，利用RNAi技术部分或全部去除目标基因mRNA，应用电镜、流式细胞仪、TUNNEL、荧光标记等方法观察其对细胞形态、细胞周期、增殖、分化、凋亡生物特性等相关指标的影响；体内试验以小鼠作为研究模型，siRNA注射于肠上皮部位，对动物行为学进行观察和尿木糖吸收率检测，对动物证候进行评价。并进行健脾药治疗，在目标基因RNA干扰后进行干预，明确目标基因参与的生物过程，从功能基因鉴定角度为脾虚证相关基因的确定提供科学依据。