HPPCn调控miR-17-92促进肝细胞癌生长转移的作用和机制研究

HPPCn ( Hepatopoietin Cn ), a hepatic stimulator factor isolated from hepatic stimulator substance, was confirmed to be related with the development of hepatocellular carcinoma. MicroRNA is a non-coding single chain RNA, and play an important role in the occurrence and development of human hepatocellular carcinoma. The experimental results showed that HPPCn can increase the expression of miR-17-92 and c-myc in hepatoma cells. MiR-17-92 is a highly conserved gene cluster, encoding miR-17-5p, miR-17-3p, miR-18a, miR-19a, miR-20a, miR-19b-1 and miR-92-1. Their involvement and the roles in hepatocellular carcinoma is not clear. This project is focused on the roles of the HPPCn / c-myc / miR-17-92 signaling pathway in liver cancer cell growth and metastasis process through establishing cell and gene knockout animal models and analyzing clinical data from patients with hepatocellular carcinoma.

Hepatopoietin Cn是一个肝细胞刺激因子，已有的研究结果表明HPPCn的表达与肝癌的发生和发展密切相关，可能成为肝癌治疗的新靶点。miRNA作为一种非编码小分子单链RNA在肝癌的发生发展中发挥重要作用。前期实验结果显示HPPCn能够促进肝癌细胞中miR-17-92及其上游转录启动基因c-myc的表达。miR-17-92 基因簇是一个高度保守的基因簇，其参与调控肝癌细胞生物学特性的作用和机制还不清楚。本申请项目在以往研究的基础上，重点围绕HPPCn/c-myc/miR-17-92调控肝癌细胞生长和转移的作用和机制，通过建立细胞及基因敲除动物模型，并结合临床肝癌病人的标本观察，系统分析HPPCn/c-myc/miR-17-92信号在肝细胞癌发生及转移过程中的作用和机制。该课题将为进一步揭示肝癌发生和转移的分子机制提供新的思路，同时可能为HCC防治提供新的药物靶标分子。

HPPCn（Hepatopoietin Cn）是我们分离鉴定的一个具有刺激肝细胞增殖活性的生长因子，已取得的研究结果表明HPPCn 及其激活的下游信号系统与肝癌的发生和发展密切相关，可能成为肿瘤治疗的新靶点。本研究主要内容确定HPPCn及其下游信号（SIP、MAPK）调控c-myc/miR-17-92表达及活性的基础上，利用慢病毒介导的miRNA 沉默策略，确定microRNA-17-92 对肝癌细胞生长、转移等生物学特性的影响，确定高表达miRNA-17-92 对正常肝细胞或肝脏干细胞恶性转化的影响。利用miR-17-92 条件敲除小鼠与HPPCn 转基因小鼠的杂交系小鼠的肝癌原位移植模型和肝癌诱发模型评价miR-17-92在HPPCn 调控肝癌发生和转移中的作用。利用生物信息学、生物芯片等确定miRNA-17-92 调节肝癌细胞生物学特性的靶基因，阐明其调控机制。课题明确microNRA-17-92促进肝细胞癌生长转移的功能和作用，并发现c-myc作为microNRA-17-92的启动子，能够介导HPPCn促进其表达上调，并进一步明确PTEN、Bcl-2是micro17-92的直接靶基因。截止目前，该研究发表SCI研究论文2篇，中文核心期刊论文2篇，获得专利授权2项，获得北京市科技进步一等奖1项。人才培养方面，毕业硕士研究生2名，博士研究生1名，获得“香江学者”人才计划资助1名。