EBV-LMP1通过XBP1u/ROS影响鼻咽癌发生发展的机制研究

Nasopharyngeal carcinoma (NPC) is a distinctive malignant tumor in southern China, recurrence and metastasis is the main cause of NPC treatment failure. To explore the molecular mechanism of the oncogenesis of NPC, looking for the effective target is the key to improve the curative effect. In our pervious study we find that LMP1 can raise ROS level in NPC cells, while, LMP1 can inhibit XBP1u expression significantly in NPC, XBP1u can increase Nrf2 expression. Base on this, we propose that EBV-LMP1 suppresses XBP1u, influences oxidative stress regulator Nrf2 express, further more impacts on NPC ROS level. To very this hypothesis, we plan to use molecular and cell biological techniques to elucidate the LMP1-XBP1u-ROS pathway, investigate the regulatory role of the pathway in NPC development and progression. This project will provide new theoretical basis for understanding the development of NPC and open up new possibilities for targeting LMP1 for NPC theraphy.

鼻咽癌是我国南方特发的恶性肿瘤，复发、转移是目前鼻咽癌治疗失败的主要原因。深入探究鼻咽癌发病的分子机理，寻找合适的治疗靶点是提高鼻咽癌治疗效果的关键。我们在前期研究中发现EBV-LMP1能够上调鼻咽癌细胞的ROS水平，同时亦发现在LMP1表达阳性鼻咽癌细胞中XBP1u的表达明显被抑制，有文献认为XBP1能够调节氧化压力关键调节分子Nrf2的表达。基于此，我们提出如下科学假说：EBV-LMP1通过抑制XBP1u的表达，影响氧化压力关键分子Nrf2，进一步影响鼻咽癌细胞的ROS水平，促进鼻咽癌的发生发展。为了证实这一假说，我们采用流式细胞计数、免疫荧光、Western Blot等实验技术深入探讨EBV-LMP1通过XBP1u影响ROS水平促进鼻咽癌发生发展的分子机制。本项目将为深入理解肿瘤的发生发展提供新的理论依据，同时为鼻咽癌靶向治疗提供新的策略。

鼻咽癌是中国特色癌，EBV在鼻咽癌发生、发展中发挥重要作用，已成为探索鼻咽癌病因及防治的重要领域。EBV编码的病毒基因产物LMP1被认为是重要的具有瘤基因功能的蛋白，普遍表达于EBV阳性的鼻咽癌中。深入探讨在EBV潜伏感染状态下，EBV-LMP1调控NPC细胞对肿瘤微环境中信号的应答方式和机制具有重要的肿瘤生物学意义，并可为EBV致瘤的机理提供新思路。.本项目的初衷是研究EBV-LMP1通过抑制XBP1u的表达，影响氧化压力关键分子Nrf2，进一步影响鼻咽癌细胞的ROS水平，促进鼻咽癌的发生发展。项目的前期我们发现且证实LMP1可以下调细胞中NQO1，HO1（这一部分的工作已经由团队另一成员完成）。同时我们构建了LMP1稳定表达的鼻咽癌细胞株，并进行RNA Sequencing，试图寻找LMP1在鼻咽癌中可能影响的信号通路及其新的分子机制。结果我们发现当LMP1在鼻咽癌细胞中过表达后Wnt通路明显上调，且Wnt下游分子的表达也可见明显增加。同时我们在蛋白水平进行了验证，同样证实了RNA Sequencing的结果。接着我们观察LMP1对鼻咽癌细胞软琼脂集落形成能力的影响，发现LMP1确实提高了鼻咽癌细胞的软琼脂集落形成能力。并且我们还发现LMP1与Wnt通路相关蛋白DVL2存在相互作用。我们进一步在前期基础上观察LMP1在鼻咽癌中的功能，发现LMP1能够促进鼻咽癌细胞的侵袭转移，同时我们敲低DVL2后LMP1所导致的琼脂糖集落形成能力的增加以及侵袭转移能力的改变都明显降低。进一步我们也观察到，LMP1能够与DVL2相互作用，而DVL2的上调是由于泛素化调控来实现，因此我们推测LMP1影响DVL2的上调可能是通过影响它的泛素化水平来实现的。.综上，EBV-LMP1可能通过与DVL2的相互作用阻止DVL2的泛素化降解并进一步影响Wnt通路，从而引起鼻咽癌细胞的干性增加，促进鼻咽癌细胞的侵袭转移。这进一步阐述了EBV-LMP1在鼻咽癌发展中的功能，为鼻咽癌致瘤的分子机理提供了新的思路，同时也为鼻咽癌的靶向治疗提供的新的可能。