腺苷A3-A1受体异聚化调控谷氨酸释放在SAH后海马神经损伤中的作用机制

蛛网膜下腔出血（SAH）后海马迟发性神经元损害（DIND）的分子机制尚不清楚，导致临床防治缺乏有效措施。我们前期研究发现谷氨酸兴奋性毒性作用参与上述损伤，并且发现腺苷A3受体（A3R）促进谷氨酸的过度释放，可能与拮抗A1受体(A1R)功能活性有关,结合文献推测存在A3R与A1R发生异聚化，导致A1R活性受抑制，谷氨酸释放增加，海马神经损伤加重的作用机制，拟采用大鼠SAH在体和离体模型，应用Co-IP、放射性配体结合实验、膜片钳、siRNA等技术研究SAH后海马A3R和A1R的表达分布及其异聚化状态，探讨干预A3R活性后对A3-A1R异聚化程度、A1R功能活性（配体结合能力、内吞转运）、谷氨酸释放的改变以及神经元凋亡情况，从而阐明A3-A1R异聚化在SAH后海马谷氨酸神经兴奋性毒性损伤中的作用和机制，为SAH后海马损伤的防治提供新的作用靶点和思路。

蛛网膜下腔出血（Subarachnoid hemorrhage，SAH）是一类临床常见的脑血管危急重症，具有死亡率高、致残率高、发病多见于中青年的特点，严重威胁人类健康和生命。SAH后海马迟发性神经元损害（DIND）的分子机制尚不清楚，导致临床防治缺乏有效措施。我们前期研究发现谷氨酸兴奋性毒性作用参与上述损伤，并且发现腺苷A3受体（A3R）促进谷氨酸的过度释放，可能与拮抗A1受体(A1R)功能活性有关。结合文献推测存在A3R与A1R发生异聚化，导致A1R活性受抑制，谷氨酸释放增加，海马神经损伤加重的作用机制。因此，我们主要针对A3R与A1R的相互作用，以及干预A3R后对A1R及谷氨酸释放调节作用及对海马神经损害的影响等方面进行了深入研究。.研究主要内容分为以下几个方面：1.在体动物模型SAH后海马A3受体表达情况；2.在体实验观察激活或抑制A3受体对SAH后海马神经损害的影响；3.离体实验研究SAH后海马神经元A3受体对A1受体的功能活性的调节，以及干预A3R后对海马神经元损害的影响；4.离体实验观察A3R在二氯化钴诱导建立PC12神经元样细胞化学性缺氧损伤模型中的保护作用。.重要结果如下：1.SAH后A3R表达量显著增加，干预A3R的表达可以明显抑制SAH后海马神经元损伤；2.A3R与A1R可以形成免疫共沉淀，siA3R可抑制A1R的表达；3.A3R在二氯化钴诱导建立PC12神经元样细胞化学性缺氧损伤模型中不能起到直接神经元保护作用。.通过本课题的研究，我们证实SAH后腺苷 A3-A1受体异聚化调控谷氨酸释放介导海马神经损伤的作用机制，证实腺苷 A3受体可抑制小胶质细胞活化发挥抗炎效应但不能直接对神经元起保护作用，从而，为从腺苷及其受体途径调节谷氨酸过度释放干预SAH继发神经损害提供新的治疗策略和药物靶标。