Toll样受体4在乙肝病毒相关肝细胞癌中的作用及机制研究

乙肝病毒（HBV）感染与肝细胞癌（HCC）发生密切相关，但其机制仍不完全清楚。申请者首先报道了MAP4K4在HBV相关HCC过表达；体内外实验结合PCR芯片检测显示，沉默内源性MAP4K4显著抑制HCC生长，并显著下调NF-kB、JNK和Toll样受体（TLR）4、5和7等的表达；TLR4位于MAP4K4基因上游，参与HBV免疫调控并在HBV阳性HCC及细胞系过表达。本课题拟进一步运用基因转染和特异SiRNA，建立TLR4过表达和低表达HCC细胞系，研究该基因在体内外对细胞生长、侵袭和转移等生物学行为的影响；应用定量PCR芯片技术结合免疫组化、免疫印迹以及基因功能研究，深入探讨TLR4-MAP4K4-NF-kB、JNK在乙型肝炎-肝硬化-肝癌发生过程中的作用及可能的信号转导途径。研究结果将对阐明TLR4在HBV诱导肝癌发生中的作用机制提供新的理论依据，并为其治疗提供新的具有潜在价值的靶点。

乙肝病毒（HBV）感染与肝细胞癌（HCC）发生密切相关，但其机制仍不完全清楚。TLR4 位于 MAP4K4 基因上游，参与 HBV 免疫调控并在 HBV 阳性 HCC 及细胞系过表达。因此, 进一步探索阐明 TLR4 在 HBV 诱导肝癌发生中的作用机制，深入探讨 TLR4-MAP4K4-NF-kB、JNK 在乙型肝炎-肝硬化-肝癌发生过程中的作用及可能的信号转导途径,对揭示肝癌的发生发展的分子机制、设计合理的治疗靶点药物及开拓临床治疗新思路具有重要意义。基于申请者的前期工作基础，申请者推测TLR4 在 HBV 诱导肝癌发生中的作用中发挥产生重要影响。.课题组在前期工作的基础上，采用RNA干扰技术，探讨TLR4表达沉默对HBV阳性肝癌细胞生物学活性的影响并深层次分析研究TLR4参与调控所涉及到的相关信号传导途径以及可能的分子机制。.目前课题研究已经结束，课题组研究发现：siRNA干扰介导TLR4基因沉默可抑制人HBV阳性肝癌HepG2.2.15细胞的增殖能力，促进细胞凋亡，阻滞细胞G2期。TLR4通过ERK信号通路途径下调c-Fos的表达。TLR4蛋白与HBX蛋白的细胞定位几乎一致，且相互结合。目前已公开发表5篇本课题相关文章，其中SCI两篇，中文核心期刊3篇。.随着研究的深入，Toll样受体4及其下游信号分子的激活方式，在乙肝病毒相关肝细胞癌发生发展中的作用机制将更为清晰透彻，并有望成为临床诊治肝细胞癌的新靶点。