VEGFR3靶向性纳米人参皂甙Rg3抑制胃癌淋巴转移的分子成像观察及机制研究

淋巴结转移是影响胃癌治疗效果及预后的主要因素，VEGFR-3信号通路是促进胃癌淋巴管生成和淋巴转移能力的主要信号通路，阻断该信号通路将成为治疗胃癌的有效手段。中医药治疗胃癌有较大的优势,大量研究集中在抗血道转移方面 ,对胃癌淋巴管生成及淋巴转移的研究滞后。已有的研究表明人参皂甙Rg3在淋巴结转移方面显示出可喜的前景，我们制备了具有淋巴靶向功能的Rg3免疫纳米微粒，用分子成像技术动态观察其对胃癌原位瘤及淋巴结等转移的抑制作用，并从淋巴管生成及VEGFR-3信号途径的调控讨论其抑制淋巴结转移的作用机理。本课题把人参皂苷Rg3制成淋巴靶向制剂，提高了中药对胃癌的抗肿瘤作用，首次从淋巴管生成及VEGFR-3信号途径的调控讨论人参皂苷Rg3的抗转移作用，有利于人参皂苷 Rg3在临床上更好的使用，为传统中药靶向治疗胃癌开辟了新途径。同时分子成像技术的应用为今后的中药抗肿瘤研究提供了借鉴。

淋巴结转移是影响胃癌治疗效果及预后的主要因素，VEGFR-3信号通路是促进胃癌淋巴管生成和淋巴转移能力的主要信号通路，阻断该信号通路将成为治疗胃癌的有效手段。中医药治疗胃癌有较大的优势,大量研究集中在抗血道转移方面 ,对胃癌淋巴管生成及淋巴转移的研究滞后。. 以DSPE-PEG2000-MAL为偶联剂，制备获得了人参皂苷Rg3肿瘤淋巴管抗体靶向免疫纳米乳, 所制得的人参皂苷Rg3肿瘤淋巴管抗体靶向免疫纳米乳为淡黄色澄清透明液体，TEM观察其乳滴为球形， 20℃条件下测定其粘度为1.09±0.03 mPa•S，电导率为368.45±0.84μs/cm，pH值为7.86±0.12，折光率为1.3379±0.0009，25℃条件下测定其Zeta电位平均值为-11.8mV，平均粒径为137.9nm，偶联率为895ng兔IgG/1mg人参皂苷Rg3 。. 通过建立荧光蛋白标记的人胃癌细胞NUGC-4裸鼠原位移植瘤模型,观察肿瘤生长、转移情况,计算抑瘤率,并通过运用免疫组织化学法、Real time-PCR等方法,检测人参皂苷Rg3免疫纳米乳对肿瘤组织中VEGF-C,VEGF-D和VEGFR-3蛋白和mRNA表达的调控作用, 运用免疫组织化学法观察肿瘤微淋巴管生成的情况，运用ELISA法检测外周血血清中MDC/CCL22、VEGF-C、TGF-β1表达情况。人参皂苷Rg3免疫纳米乳对原位移植瘤增殖和转移具有明显抑制作用;可明显降低移植瘤组织中淋巴管密度,能够不同程度地下调淋巴管生长因子VEGF-C、VEGF-D及其受体在蛋白水平和mRNA水平的表达,可能是其抑制肿瘤淋巴转移的分子生物学机制;可降低胃癌小鼠模型外周血血清中MDC/CCL22、VEGF-C、TGF-β1表达。. 研究建立了一个简便、实用和稳定的人胃淋巴内皮细胞培养方法，体外观察了人参皂苷Rg3免疫纳米乳可特异性结合人胃淋巴内皮细胞。. 探讨了人参皂苷结构修饰物的体内抗肿瘤活性, HRG具有体内抗肿瘤活性，能显著抑制H22-CAM抑制瘤的生长和其诱导的血管生成，其机制可能与降低移植瘤微血管密度和下调血管内皮生长因子表达有关。