分解尿毒症毒素的基因工程菌的质粒修饰及功能研究

本项目用乳酸菌食品级基因高效表达系统nisA启动子修饰已构建的含尿酸氧化酶和肌酐水解酶基因的质粒，重组成新一代质粒pMJ28-u/c并转化保加利亚乳杆菌以提高酶的产量和酶的活性。并研究重组乳酸杆菌的下列功能：1 .重组乳酸菌在无菌SD肾衰大鼠消化道黏膜中粘附定植和转代繁殖;2.重组乳酸杆菌质粒的自我复制及其在同种和异种菌中的传递能力,使慢性肾衰大鼠肠道内主要菌群如双歧杆菌、乳酸球菌、大肠杆菌、肠间球菌等均携带尿毒素分解质粒，造成降解尿毒素的庞大菌群。3.重组质粒的体内外，包括肾衰肠道环境下的遗传稳定性研究使之能持久定植于肠道，类似移植活体细胞，持续降解尿毒素。4.重组乳酸菌降解尿素、尿酸、肌酐、硫酸吲哚酚、同型半胱胺酸等的能力。5.研究其维生素合成及降脂功能以弥补慢性肾衰维生素缺乏和脂质代谢紊乱等缺陷。为慢性肾衰的综合治疗创建一种较为理想的活菌制剂。