基于LPS/TLR4信号通路的朝药榆树皮抗败血症诱导急性肝损伤的物质基础及作用机制研究

Sepsis-induced liver injury plays a very important link in the process of the development of multiple organ dysfunction. Our previous research idicated, the methanolic extract of the stem and root barks of Ulmus pumila L. showed significantly protective effects on LPS/D-GalN induced hepatic injury in mice. Based on the preliminary work, we proposed that the triterpenes and tannins maybe are the main active chemical constituents. Following up previous research, the purposal of this study is further bioguided isolation to yield the activity compounds by analyzing comprehensively phytochemistry, analytical chemistry and molecular biology. Subsequently, the mechanisim of bioactive compounds will be performed targeting LPS-TLR4 signaling with TLR4-NF-κB-TNF-α, TLR4-MAPK-AP-1 and TLR4/NF-κB/COX-2&iNOS three pathways on the three layers of cell, moleculer and organ. The result of this research can establish the foundation for exploitation of against sepsis agents from Korean Chinese folk medicine around Changbai Mountain area.

败血症诱导急性肝损伤在多器官功能障碍综合征的发生、发展中起着重要作用，是引起败血症死亡的最重要的原因之一。前期研究发现，朝药榆树皮醇提物对LPS/D-GalN诱导的败血症急性肝损伤有明显的保护作用，并且初步证实其富含的三萜和鞣质类是发挥药效的重要物质基础。本项目拟继续结合中药化学、药物分析和分子生物学对该民族药的药效物质基础进行进一步深入的研究，并基于LPS-TLR4靶点，从细胞、分子及整体水平上，沿TLR4-NF-κB-TNF-α、TLR4-MAPK-AP-1、TLR4/NF-κB/COX-2&iNOS三个信号轴线阐明榆树皮活性成分对败血症诱导急性肝损伤的保护作用机制。本项目不仅对防治败血症急性肝损伤新药开发提供有效的理论依据，亦将为我国民族医药的发展和长白山地区优势资源的综合开发利用具有十分重要的意义。

肝脏不仅是败血症中最易受损的器官之一，还对败血症发生、发展有举足轻重的作用。本项目结合中药化学、药物分析和分子生物学对榆树皮的药效物质基础进行了深入的研究。本实验选择了几个具有代表性和能突出反映肝损伤及炎症因子：TNF-α、NO、IL-6和目前临床上检测肝损伤程度的AST、ALT等重要指标，体外筛选了化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞系所产生的炎性介质NO，IL-6和TNF-α抗炎因子含量的影响。其中化合物23在中剂量25mg/kg时，对败血症性肝损伤小鼠48 h存活率达到40%，并在高剂量（50mg/kg）组小鼠肝组织切片在光镜下可见炎性肝细胞明显减少，肝细胞脂肪变性明显好转，正常肝细胞数目增多。在体内实验中，化合物23能显著不仅降低了败血症肝损伤小鼠死亡率，还降低了小鼠血清AST、ALT、TNF-α和NO含量，具有显著的肝保护作用；同时升高了小鼠肝组织SOD活性和降低了MDA的含量，具有明显的抗氧化作用。该研究丰富了榆树皮的化学成分，找出了具有良好开发潜力的防治败血症先导化合物。但由于新冠疫情影响，深入探讨榆树皮活性成分抗败血症急性肝损伤的作用机制研究仍在进行中。.在对榆树皮化学成分的研究基础上，采用HPLC-UV法同时测定了10批榆树皮中4个黄酮类化学成分taxifolin-6-C-glucoside，catechin-7-O-β-D-xylopyranoside，catechin，catechin-7-O-β-D-apiofuranoside的含量并进行了比较研究。所建立的分析方法填补了榆树皮质量控制领域的空白，对全面系统地建立该民族药材的质量标准具有科学的理论意义。.本项目不仅对防治败血症急性肝损伤新药开发提供有效的理论依据 ，亦将为我国民族医药的发展和长白山地区优势资源的综合开发利用具有十分重要的意义。