中医“阳在外，阴之使”理论实证特应性皮炎患者MicroRNA表达谱调控作用的研究

Atopic dermatitis is a common hereditary and autoimmune disease in children. Chinese medicine believes that it is due to spleen deficiency and the pathogenic factors of wind、dampness and hot in the skin. We believe that the process of AD's repeated attacks and mitigation just reflects alternating between heart-fire hyperactivity(syndrome of interior dampness-heat)and spleen deficiency dampness aggregatesd and the long course of disease will result blood deficiency and wind-dry. The microRNAs(miRNAs) are a newly found class of single-stranded molecules which can regulate the expression of immune target gene and play an important regulatory role in every stage of immune response of AD.The miRNA expression profiles of AD patients、the expression pattern of related cytokines and it's association with CXC、CC chemokines of skin lesion will be studied by methods of case-control study 、the methods of fluorescent quantitative RT-PCR immunohistochemistry and FISH etc.so as to ascertain the advancement rule of course of AD.These findings could reveal the pathogenesis molecular mechanisms of AD from the gene-disease-syndromes angle, and they could also provide a basis for the theoretical scientific connotation of wind、dampness and heat pathogen in the skin and expression of "Protection of yang outside yin".

特应性皮炎（atopic dermatitis，AD）是一种儿童青少年常见的遗传性和免疫性疾病，中医认为是由于脾肾亏虚，外加风、湿、热诸邪，相搏于皮肤而发病。AD 反复发作和缓解的过程，正是心火亢盛（湿热内蕴）和脾虚湿蕴相互交替起主导作用的结果，长期病程导致血虚风燥。小 RNA（microRNAs，miRNAs）是近年来发现的能调节免疫靶基因表达的一组单链小分子 RNA，在AD 免疫反应的各个阶段都可发挥重要的调控作用。本研究拟采用病例对照研究方法，运用荧光定量RT-PCR、免疫组化和Western Blot等方法研究AD 患者miRNA 表达谱及相关细胞因子的表达规律，并研究其与皮损中CXC 和CC 型趋化因子之间的关联，从而探明AD 的病程进展规律。本研究结果从基因-疾病-证候相关角度揭示AD 发病的分子机制，为“风湿热邪客于肌肤”和“阳在外，阴之使”理论科学内涵提供依据。

特应性皮炎（atopic dermatitis，AD）是一种儿童青少年常见的遗传性和免疫性疾病，中医认为是由于脾肾亏虚，外加风、湿、热诸邪，相搏于皮肤而发病。小 RNA（microRNAs，miRNAs）是近年来发现的能调节免疫靶基因表达的一组单链小分子 RNA，在AD 免疫反应的各个阶段都可发挥重要的调控作用。我们运用荧光定量RT-PCR、细胞实验和生物信息学等方法研究发现多种miRNAs分子包括miR-203a、miR-125、miR21、miR-199、miR-155-5p、miR146与miR223等在不同证型的AD患者中存在一定程度的差异表达，其中miR-125b的致病特点研究认为与中医“虫毒理论”中的“虫邪致病”较为吻合；而miR-203a分子可能是“毒邪致病”的客观微观指标之一。我们首次发现miR-199-3p与5p分子在AD的致病机制中起平衡调节作用，miR-199与miR-155这一对分子均在血虚风燥组中差异表达较为显著。磷酸二酯酶（PDEs）家族中的PDE4D及基质金属蛋白酶(MMP)家族中的MMP16分别与miR-199、miR-155具有靶向调控关系， miR-199b-5p与miR-155-5p之间，以及miR-199-3p与miR-155-3p之间可能存在拮抗平衡调控作用，这一对分子互为表里在AD病程中展示出的调节机制在免疫性皮肤病中具有深远的借鉴意义，miR-199、 miR-155为“阳”而PDE4D、MMP16 为“阴”，这为“阳在外，阴之使”理论科学内涵提供了一定的依据。美国辉瑞公司的PDE-4抑制剂克立硼软膏（商品名舒坦明）在国内上市不久，我们发现的hsa-miR-199、 hsa-miR-155分子以及其靶基因MMP16可能在许多方面可以弥补PDE-4抑制剂的缺陷，为提高AD的临床疗效做出较大贡献。