布氏菌减毒疫苗株M5-90的bp26蛋白表位分子修饰与初步免疫评价

布氏菌病（布病）是一种重要的人兽共患传染病，每年造成的经济损失近30亿美元。我国布氏菌减毒疫苗M5-90对成年羊有很好的免疫保护效果，但免疫后的动物无法与自然感染布菌的动物区分，对布病检疫造成困难，限制了疫苗使用。前期研究采用敲除bp26蛋白基因，试图对M5-90疫苗株进行改造，导致了疫苗免疫效果降低。业已证实，bp26是非常好的诊断抗原，并含有保护性抗原表位。本课题申请人在前期研究中，发现了M5-90疫苗株bp26蛋白的3个线性B细胞表位，为疫苗株分子修饰改造指出了新的方向。本课题拟通过选择性地修饰M5-90疫苗株bp26抗原B细胞表位，改变1或2个特异性抗体识别表位，继续保留疫苗株生物学与保护性免疫特性不变，建立鉴别诊断方法，进而区分疫苗免疫与自然感染动物，为羊布病免疫预防和检疫提供关键技术支持。

本课题研究揭示了布氏菌弱毒疫苗M5-90两种主要外膜蛋白BP26和OMP31抗原的T和B细胞表位,并制备了具有布氏菌检测抗体价值的单抗，初步建立细胞水平的布病诊断的方法，为布病免疫预防、治疗提供关键技术支持。揭示了我国疫苗M5-90免疫接种绵羊的细胞和体液免疫状况，发现了5个通用性T 细胞表位，分别是BP26-6, -8, -11, -12 和 OMP31-23；5个种属特异性表位BP26-10, -18, -21 and -22 and OMP31-12。发现导致疫苗保护效率降低可能与Treg细胞快速增殖并保持高位水平，而免疫效应T细胞水平快速下降的免疫抑制状态相关。研究证实布氏菌病对我国人民健康与公共卫生安全危害日趋严重,尤其在布病流行地区应考虑增加血液筛查，该策略将降低经输血途径造成布病感染的风险。课题研究成果为今后新型布氏菌疫苗研究或现有疫苗改造提供了理论依据。研究认为M5-90疫苗诱导产生的免疫抑制现象，若以传统的疫苗菌株筛选或采用减毒等方案也难以获得更徍的布氏菌疫苗，建议在未来的布菌疫苗研究中，应根据动物免疫遗传特性，设计出消除或减弱诱导免疫抑制的新型布菌疫苗，同时加强对现有布氏菌疫苗的免疫调控与干预方法研究，实现拮抗疫苗诱导的免疫抑制，增强疫苗保护性免疫反应，延长免疫期效，提高免疫效果。课题产出SCI研究论文4篇，累计影响因子（IF）18.35分，获授权专利2个。培养的硕士研究生2人获国家奖学金。