嗜肝DNA病毒易感性相关肝细胞蛋白的研究

由于缺乏乙肝病毒（HBV）自然感染的细胞培养系统，宿主蛋白如何参与HBV感染过程，是病毒-宿主蛋白相互作用研究中的难点之一。鉴于同属嗜肝DNA病毒科的鸭乙型肝炎（DHBV）与HBV具有相似的生物学特性，本课题组已成功建立鸭原代肝细胞-DHBV感染细胞模型，并在预实验中证实不同培养条件下的鸭原代肝细胞对DHBV的易感性存在明显差别。本项目将利用比较蛋白质组学技术研究对DHBV易感性差异显著的鸭肝细胞蛋白质谱，以寻找鸭原代肝细胞中与病毒易感性以及感染相关的宿主蛋白，侧重筛选可能与DHBV结构蛋白相互作用的宿主蛋白，构建真核表达质粒，结合其在细胞内共定位和免疫共沉淀技术验证DHBV蛋白-宿主蛋白的相互作用；利用RNA干扰技术对靶蛋白特异性沉默结合DHBV攻击实验以研究该宿主蛋白在病毒过程中的作用及分子机制。本课题成果将为HBV感染中病毒-宿主蛋白相互作用以及抗病毒药物的研究提供理论基础。