亚硫酸盐对肝细胞极低密度脂蛋白组装和分泌的影响

亚硫酸盐是一种世界范围内广泛使用的食品药品添加剂，且是大气污染物二氧化硫在人体内的代谢衍生物。本组前期研究和既往报道显示亚硫酸盐和二氧化硫接触后动物肝脏出现脂肪沉积、甘油三酯水平增加和极低密度脂蛋白分泌减少，人群中出现血清转氨酶增加、肝脏坏死和肝癌的发病率增加等现象，但其发生机制不清。本课题拟采用定量荧光PCR（Q-PCR）技术、细胞免疫荧光化学法、蛋白印迹法对亚硫酸盐接触后肝细胞内影响极低密度脂蛋白组装、转运和分泌的重要因子甘油三酯脂肪酶（TGH）、甘油二酯酰基转移酶（DGAT2）、甘油三酯转移蛋白（MTP）、腺苷酸核糖基化因子1（Arf-1）和载脂蛋白E在基因水平、蛋白质水平和功能水平上的变化进行研究，跟踪各有关因素的变化规律和发展顺序，推测亚硫酸盐引起肝细胞脂肪变的可能机制，为提高人们对亚硫酸盐的危害性的认识提供理论依据，为在实践中预防亚硫酸盐的肝损伤作用从而保障人群健康提供科学依据

亚硫酸盐是一类常见的食品添加剂,也是大气污染物二氧化硫在人体的代谢衍生物. 前期研究和一些文献报道提示亚硫酸盐可引起受试动物肝细胞内脂肪积累,本课题以亚硫酸钠为亚硫酸盐的代表物，对不同的肝细胞株进行体外染毒, 检测肝细胞内TG 含量，极低密度脂蛋白组装和分泌水平、TG合成和脂肪酸β-氧化的变化情况，探寻其致脂肪病变的机制。结果表明：.1．亚硫酸钠能够在不影响肝细胞正常形态的情况下，引起张氏肝细胞内出现明显地脂滴，并且伴随着TG含量的增加; 对于HL-7702 和 HepG2 而言，亚硫酸钠只能在明显影响肝细胞形态和活性的情况下引起肝细胞内出现脂滴或TG 含量增加。.2．亚硫酸钠在处理HL-7702 肝细胞24h 后极低密度脂蛋白分泌水平高于阴性对照组，而在接触48h后VLDL分泌水平与对照组无差异；亚硫酸钠还可促进apoB100 的分泌外排，接触24h和48h后，都高于对照组；对于apoE的分泌无明显影响。.3．亚硫酸钠对肝细胞内VLDL 组装相关的分子表达的影响:apoB100的基因和蛋白表达水平均无明显变化；对MTP基因表达水平无明显影响，却可以促进该分子的蛋白表达水平；可引起甘油三酯水解酶(TGH) 基因和蛋白表达的同时增加。.4．亚硫酸钠对肝细胞内VLDL 转运分泌相关分子表达的影响:亚硫酸钠对VLDL转运相关分子腺苷酸核糖基化因子1（Arf-1）、包被蛋白Ⅰ(COPⅠ)基因表达无明显影响,对蛋白表达的促进作用主要表现在较高剂量组即大于2.5 mM Na2SO3组；对apoE 的基因表达无明显影响，可增加HL-7702 肝细胞内apoE 蛋白含量增加。.5． 亚硫酸钠对TG 合成的影响：亚硫酸钠对甘油二酯酰基转移酶2（DGAT2）的基因和蛋白表达无明显影响；对甘油二酯酰基转移酶1（DGAT1）的基因表达无影响，可促进该分子的蛋白表达水平；亚硫酸钠对固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1C) 的蛋白表达无明显影响。.6．亚硫酸钠对脂肪酸β-氧化的影响：亚硫酸钠可明显抑制肝细胞内肉碱酰基转移酶1（SREBP-1C）的蛋白表达水平。.结论：亚硫酸钠可导致肝脏脂质代谢紊乱，既可通过抑制脂肪酸的β-氧化促进脂肪积累，也可通过增加apoE、TGH和DGAT1 的表达促进VLDL 的分泌。