基于Legumain、MSP的"双效"靶向TAMs策略及对乳腺癌侵袭转移、新生血管生成的调节

Targeted Stat3 inhibition of TAMs is a potential and multicomponent strategy of tumor therapy. Based on previous research work（NSFC30971131），the TAMs -targeted liposome drug delivery nanoparticles (NPs) with "double-effect" based on Legumain and MSP is initiatedly designed in our study. As its efficient Stat3 inhiibition of TAMs, the effects of TAMs are investigated within tumor microenvironment(TME), and the relationship between Stat3 inhibition and suppression of invasion, metastasis and angiogenesis in breast cancer is studied. These results will provide important experimental foundation for Stat3 as a new therapeutic target in TME, and have a beneficial try for targeted therapy of tumor. Moreover, instead of the traditional analysis method of TAMs via depletion of macrophage, the TAMs - specific NPs not only can achieve target of TAMs in tumor tissure, but also has more efficient suppression of expression of target gene in TAMs. And so, the strategy can be used to more deeply explore the roles of TAMs and as well as its important genes within TME, and promote the transition of basic research to clinical practice.

靶向抑制TAMs的Stat3是一极具潜力、全效的抗肿瘤策略。在前期工作（NSFC30971131）基础上，我们首创设计基于Legumain、MSP的"双效"靶向TAMs的纳米脂质体载药系统（NPs），通过其发挥高效抑制TAMs中Stat3的作用，研究TAMs在肿瘤微环境（TME）中的角色和功能作用，并探讨抑制TAMs中Stat3与降低肿瘤细胞侵袭转移、新生血管生成的关系，为探索Stat3作为TME治疗新靶点提供重要的实验基础，并为开展靶向性肿瘤治疗进行有益的尝试。此外，与传统的采用巨噬细胞耗竭实验分析TAMs功能的方法相比，我们设计的特异靶向TAMs的NPs，不仅能实现肿瘤组织中TAMs的靶向性，而且能高效抑制TAMs中目的基因的表达，能更深入、有针对性地探讨TAMs及其重要基因在TME中的作用，为探索TAMs作为TME治疗新靶点提供重要的技术支持，并能积极推进基础研究向临床实践过渡。

本课题构建了靶向巨噬细胞CD68特异性启动子调控的STAT3显性负性突变体STAT3β的表达载体——pAdCD68STAT3β。经体内外实验证实，pAdCD68STAT3β不仅能实现TAMs的特异靶向性，而且能高效抑制TAMs中Stat3基因的表达；pAdCD68STAT3β能通过调节TAMs-肿瘤细胞交互作用，抑制4T1乳腺癌细胞生长、侵袭、转移和新生血管生成，且在荷瘤小鼠体内对乳腺癌生长、转移、新生血管生成具有显著抑制效应。由此证实了我们提出的靶向抑制TAMs中的STAT3作为重要的抗肿瘤策略的可行性，为TAMs作为肿瘤微环境治疗新靶点提供了全新的思路，更为积极推进基础研究向临床应用的过渡提供了重要的实验基础。.此外，我们还开展了以下研究工作：①通过研究Leptin对乳腺癌细胞EMT的影响及其机制，深入解析Leptin调控EMT关键转录因子Snail的分子机制，证实C14orf166是影响乳腺癌EMT的关键分子和重要靶点，为寻找乳腺癌EMT的治疗新靶点，提供了重要实验基础；②初步解析糖代谢关键酶PKM2、FBP1的异常表达对乳腺癌细胞他莫昔芬耐药的影响，以期通过后续的深入研究工作，为从全新角度深入解析乳腺癌内分泌治疗抵抗提供了线索。