小鼠病毒性肝炎模型中HMGB1-TLR4天然免疫信号通路的免疫调控研究

HMGB1是一种高度保守的核蛋白，作为DAMPs类内源性物质和晚期炎症因子具有多种功能。TLR4是一种重要的天然免疫模式识别受体，近期发现TLR4通路在脂肪病变、肿瘤发生和移植免疫方面具有重要功能。其中HMGB1-TLR4之间的相互作用在无菌性炎症模型中研究较多，但在小鼠病毒性肝炎引起的急性炎症模型中的研究还未见报道。本课题首先利用Anti-HMGB1抗体和HMGB1抑制剂甘草次酸(GA)，在MHV感染模型中，研究HMGB1水平和活性对小鼠肝脏损伤的重要影响作用。然后利用TLR4和MyD88敲除小鼠探索TLR4通路及其下游信号途径对病毒性肝损伤的介导作用，同时验证重组HMGB1分子与GA的作用方式。最后阐明GA通过对HMGB1-TLR4途径的调控来实现治疗病毒性肝损伤的机制。本课题研究对于病毒性肝炎引起的肝损伤的天然免疫信号途径研究和利用该途径进干涉治疗具有重要的理论指导意义和应用价值。

HMGB1 和TLR4在天然免疫途径中是重要的炎症相关配体和受体分子，它们之间的相互作用和功能以前在无菌性炎症模型中研究较多，但在病原微生物引起的急性炎症感染模型中还很少报道。在本课题研究中，我们在MHV病毒染模型中，首次发现中药小分子成分甘草次酸（GA）在感染引起的病毒性肝损伤中具有类似HMB1抗体效果的抑制功能，另外在体外细胞试验中也证明GA可以通过影响HMGB1水平来对病毒性肝损伤产生免疫调控作用。我们进一步也鉴定了病毒性肝损伤时GA 通过HMGB1-TLR4途径对天然免疫的调控方式以及下游细胞因子IL-10与之密切相关。此外在中药传统配方的小鼠灌胃实验中，我们证明甘草活性成分确实能够起到解毒和减轻炎症损伤的功能，最后我们在GA给药形式优化方面也做了一定的探索研究。总之，我们对于病毒感染引起的HMGB1-TLR4信号通路机制研究和干涉治疗研究方面取得了重要的探索性研究结果，这对于将来的中药小分子治疗的功能研究奠定了较好的理论基础。