烟粉虱传播烟草曲茎病毒的分子机制

烟草曲茎病毒(TbCSV)是烟草、番茄的一种重要病害，作为TbCSV传播的唯一媒介，烟粉虱在TbCSV的传播过程中起着决定性的作用。然而，关于烟粉虱传播TbCSV的分子机制研究还很少，TbCSV在烟粉虱体内存活及扩散的分子机制研究更是空白。本项目计划从以下两方面揭示烟粉虱传播TbCSV的分子机制。首先，利用PCR和FISH等分子生物学方法对TbCSV在烟粉虱体内的循环路径进行定位研究；其次，利用数字基因表达谱、噬菌体表达文库及酵母双杂交等手段克隆烟粉虱体内参与TbCSV存活及扩散的关键基因，利用基因突变、免疫共沉淀等方法明确相关蛋白和病毒结合的分子机制，并通过RNAi等方法确定相关蛋白在烟粉虱传播TbCSV过程中的功能。研究结果将揭示烟粉虱传播TbCSV的分子机制并可为开发阻断病毒传播的药物提供合适的靶标。

烟草曲茎病毒 (TbCSV) 是烟草、番茄的一种重要病害，作为TbCSV传播的唯一媒介，烟粉虱在TbCSV的传播过程中起着决定性的作用。本项目首先利用PCR和FISH方法对TbCSV在烟粉虱体内的循环路径进行定位研究，同时利用数字基因表达谱等手段克隆烟粉虱体内参与TbCSV存活及扩散的关键基因，利用免疫共沉淀等方法明确相关蛋白和病毒结合的分子机制，确定相关蛋白在烟粉虱传播TbCSV过程中的功能。研究结果表明，TbCSV在烟粉虱体内的循环途径为头→中肠→血淋巴→唾液腺，TbCSV在烟粉虱隐种B和隐种ZHJ-1内的循环途径无特异性；在解剖的获毒24h 时的烟粉虱个体的头部、中肠和唾液腺内均可检测到病毒粒子的存在。TbCSV的侵染可以显著影响烟粉虱体内细胞周期和代谢相关基因的表达，对烟粉虱造成不利影响。病毒侵染烟粉虱组织后可以显著激活烟粉虱的细胞和体液免疫反应，导致病毒粒子数量的不断减少。PHGPX 基因的上调可能与烟粉虱应对病毒侵染产生的防御反应相关，并参与清除烟粉虱体内的病毒粒子。纯化后的CP 蛋白可以被特异性的单克隆抗体所结合，饲喂烟粉虱后这些蛋白主要位于烟粉虱的中肠部分。另外，TbCSV外壳蛋白可以显著降低烟粉虱传播病毒的能力，表明TbCSV 外壳蛋白可以和病毒传播的受体结合。这些结果揭示了烟粉虱传播TbCSV 的分子机制并可为开发阻断病毒传播的药物提供合适的靶标。