CD11c+HLADR+树突状细胞调控OHSS发生及对胚胎早期发育影响的作用与机制

Ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) is one of the main complications in assisted reproductive technology. The pathogenesis of OHSS is associated with VEGF. CD11c+HLADR+dendritic cells(DCs) are the most powerful antigen presenting cells in human bodies and no research has been involved in OHSS so far. In our previous studies, we found that CD11c+HLADR+DCs might be involved in the occurrence of OHSS and affected the development of embryos, but the mechanism needs to be further explored. Based on ILT4 signaling pathway is crucial for CD11c+HLADR+ DCs immune activation. VEGF is an important effector molecule in the downstream of EPK signaling pathway. So we propose the following hypothesis: CD11c+HLADR+ DCs may regulate the activation of EPK pathway via the ILT4 receptor signaling pathway to increase the expression of VEGF and thus participate in the occurrence of OHSS, and the changes of related factors caused by the interaction between VEGF and CD11c+HLADR+ DCs may affect the development of the embryos. To test this hypothesis, flow cytometry, RNA interference, time-1apse delay camera technology and so on will be used to explore the function and mechanism of CD11c+HLADR+ DCS in OHSS. This study will provide a theoretical basis for the prevention and treatment of OHSS and provide a theoretical basis for the improvement of the quality of embryos.

卵巢过度刺激综合征（OHSS）是辅助生殖技术的主要并发症，研究表明VEGF与其发病相关。CD11c+HLADR+树突状细胞(DCs)是抗原提呈作用最强的免疫细胞，迄今未见其在OHSS发生中的研究。我们前期研究中发现CD11c+HLADR+DCs可能参与OHSS的发生并影响胚胎发育，但作用机制有待深入探讨。基于ILT4信号途径对CD11c+HLADR+DCs的免疫激活至关重要且VEGF是ERK信号通路下游重要的效应分子，我们提出假说：CD11c+HLADR+DCs经ILT4信号途径激活ERK通路上调VEGF的表达参与OHSS的发生，同时与VEGF相互作用引起相关因子变化影响胚胎发育，为验证此假说，拟通过流式细胞术，RNA干扰，延时摄像等手段从细胞、因子、胚胎等多方面探讨CD11c+HLADR+DCs调控OHSS发生及对胚胎发育影响的机制，为OHSS的预防治疗及胚胎质量的提高提供理论依据。

卵巢过度刺激综合征（OHSS）是辅助生殖技术的主要并发症，OHSS的总体发生率为 23.3%，其发病机制并不清楚。研究表明VEGF与OHSS发病相关 ，CD11c+HLADR+树突状细胞(DCs)是抗原提呈作用最强的免疫细胞，本研究通过检测不同严重程度OHSS患者卵泡液内CD11c+HLADR+DCs及相关细胞因子、VEGF的表达情况，发现OHSS患者卵泡液中CD11c+HLADR+DC显著高于正常患者，且随着严重程度加重，细胞数量越高，卵泡液内OHSS组VEGF的表达水平均显著高于正常对照组（P＜0.05），OHSS组卵泡液内VEGF水平与HLA-DR成正相关，提示卵巢血管渗透性增加与卵巢炎症反应程度相关，OHSS患者卵泡液呈现一种免疫应答的状态，炎症反应参与了OHSS的发生。用不同质量浓度VEGF刺激CD11c+HLA-DR+DCs后，IL-12、IL-23和TNF-α mRNA表达均上调（P＜0.05），提示VEGF通过对树突状细胞的作用促进一些炎症因子的分泌，引起炎症的级联放大作用，加重OHSS的病理生理过程。用不同浓度VEGF与CD11c+HLADR+树突状细胞培养24小时后将上清液加入培养基中对人3PN合子进行培养，并用Time-1apse延时摄像技术并结合胚胎评分系统观察早期胚胎发育，结果发现与对照组比第一次细胞卵裂时间延长，t5延长，s2延长，卵裂球不均、空泡、碎片发生率增加，胚胎累计评分下降，且与浓度相关，提示VEGF与CD11c+HLA-DR+DCs相互作用引起细胞因子变化影响胚胎发育，有损胚胎的发育潜能，但其分子机制有待于进一步阐明。总之，本课题综合了生殖生物学、免疫学、分子生物学等多门学科的新技术、新理论，从免疫学的全新角度，首次对CD11c+HLADR+DCs在OHSS发生中的作用与机制及对早期胚胎发育的影响进行深入研究，具有一定的先进性。通过对本课题的研究,深入的探讨人类辅助生殖技术过程中OHSS发生的免疫方面相关机制,并为提高OHSS患者胚胎质量提供新的思路,从而可以更好预防OHSS的发生,提高患者妊娠率,具备一定的科学意义。