细胞应激颗粒形成与丙型肝炎病毒复制关系的研究

应激颗粒(stress granules，SG）被认为是细胞遭遇应激状态时在胞浆内形成的存放和保护mRNA和蛋白质的微体，参与决定mRNA的命运。有研究表明，许多RNA病毒复制同SG相关，可以被其抑制或促进。本室前期研究发现SG关键组成蛋白G3BP（Ras-GTPase-activating protein binding protein）参与丙型肝炎病毒（HCV）复制复合体组成并为HCV复制所需，提示SG可能在HCV复制中发挥作用。本项目拟在此基础上进一步深入探讨细胞内应激颗粒（SG）形成与HCV复制的关系，明确病毒感染不同阶段中细胞内应激颗粒的状态及G3BP等SG组成蛋白在HCV基因翻译，复制以及病毒包装中的作用。研究结果将有助于进一步了解HCV复制及致病机制，有望为发展新的抗HCV策略提供理论和实验基础。

应激颗粒(stress granules，SGs）被认为是细胞遭遇应激状态时在胞浆内形成的存放和保护mRNA和蛋白质的微体，参与决定mRNA的命运。有研究表明，许多RNA病毒的复制同应激颗粒相关，可以被其抑制或促进，同时应激颗粒也可能被病毒所调控或影响。本室前期研究发现应激颗粒关键组成蛋白G3BP（Ras-GTPase-activating protein binding protein）参与丙型肝炎病毒（HCV）复制复合体组成并为HCV复制所需，提示SGs可能在HCV复制中发挥作用。本课题在此基础上进一步深入探讨了细胞内应激颗粒（SGs）形成与HCV复制的关系，发现HCV感染各个阶段仅在少数细胞中诱生应激颗粒（3%-13.4%）；而HCV感染的细胞在受到低剂量的应激颗粒诱导剂（亚砷酸钠，NaAsO2）的刺激下产生应激颗粒的比例低于未感染细胞，提示HCV感染可能对应激颗粒的产生具有一定的抑制作用；进一步研究发现这一作用可能通过病毒复制酶NS5B蛋白与G3BP1蛋白的相互作用实现；这种抑制可能有助于病毒维持低水平复制。另一方面，对SGs组成的关键蛋白G3BP1及TIA1等在HCV复制中的作用进行了深入研究，发现干扰G3BP1或TIA1在HCV感染的早期（6-8小时）均能影响病毒RNA的稳定性；但在病毒感染晚期（24-48小时）这两个蛋白对HCV的影响则不同，siG3BP1明显抑制病毒复制，而siTIA1则对病毒的复制及翻译无明显影响；提示SGs组成关键蛋白在病毒感染的不同时期可能起到不同的作用，其中的具体机制值得进一步深入研究。综上所述，本研究结果将有助于我们了解HCV持续性感染建立和维持机制，可能为开发新的抗病毒药物提供潜在靶点。