基于超声介导的半乳糖修饰脂质微乳/微气泡肿瘤靶向载药系统的研究

选用可注射用脂质及稳定剂，制备超声介导的载药半乳糖修饰氟碳脂质微乳/微气泡，确定最优处方及其制备工艺。分别利用显微镜、透射电镜、倒置显微镜等手段对微乳/微气泡载药系统进行评价，同时从热力学及动力学的角度研究其体内外释放机制，建立数学模型进行拟合，为该给药系统的评价提供新的理论依据。研究顺铂半乳糖修饰脂质微乳/微气泡的吸收、分布、生物转化和消除过程，为该系统的安全使用奠定基础。以大鼠为模型动物，超声下观察其显象效果及治疗效果，选择一系列具有不同亲水亲油性的抗癌类药物为模型药物，通过体内外评价，研究氟碳类微乳/微气泡的释放机制及其抗癌效果，为超声介导下的微气泡载药系统的应用提供一个新的思路。

本课题以半乳糖化磷脂、胆固醇为成膜材料，维生素E为稳定剂，十二氟戊烷为核内物质，分别采用薄膜分散法、乙醚注入法、乙醇注入法等制备制备超声介导的载药半乳糖修饰氟碳脂质微乳/微气泡，确定了最优处方及其制备工艺。分别利用显微镜、透射电镜、倒置显微镜等手段对微乳/微气泡载药系统的粒径、气泡浓度及外观形态进行评价，采用葡聚糖凝胶柱法测定了微乳/微气泡载药系统的载药率。采用微气泡原理制备了VB2内多空漂浮微球，对空漂浮微球的形态、漂浮性能等进行了体外评价。以γ闪烁显像技术评价了微球在人体内的胃漂浮能力，内多空漂浮微球在人胃内具有良好的漂浮性能，健康志愿者体内药物动力学的研究表明内多空漂浮微球可明显增加VB2在人体内的生物利用度。对脂质微乳/微气泡的组织相容性进行了研究，过敏性实验结果表明顺铂脂质微乳/微气泡组注射液豚鼠过敏试验阴性，无过敏反应；体外溶血实验结果表明顺铂脂质微乳/微气泡体外不溶血，也不凝血，其渗透压在生理安全范围内，且不含溶血成分，作为注射剂可安全使用；血管刺激性实验结果表明脂质微乳/微气泡对家兔耳缘静脉未见明显刺激作用。小鼠急性毒性实验测得脂质微乳/微气泡注射液LD50为257.2 mg/kg。建立了Walker-256大鼠肝癌植入模型，使用Philips iU22型超声诊断仪，分别于造影剂注射前及注射后不同时间点采集大鼠肝脏声像图，实验结果表明脂质微泡给药剂量为0.11ml/kg时，所有实验大鼠可见肝实质明显增强，造影剂填充均勾，与周围组织分界清晰，可知造影剂可明显增强超声造影效果，随着剂量的增加，大鼠肝实质超声显像效果增强，而且其增强显影时间更长。建立了血样中顺铂的含量测定方法，对顺铂脂质微乳/微气泡的大鼠体内药动学进行了研究，结果表明顺铂脂质微乳/微气泡组的AUC和Cmax均高于顺铂溶液组，Tmax增大，这说明顺铂脂质微乳/微气泡尾静脉后在血液中的药物浓度较高，可提高顺铂的体内生物利用度，在体内缓慢释放药物。建立了心、肝、脾、肺、肾等组织样品中顺铂的含量测定方法，顺铂脂质微乳/微气泡的大鼠体内组织分布研究结果表明，与顺铂注射液相比，顺铂脂质微乳/微气泡在体内的分布特性发生较大改变，在肝脏中分布明显较多，给药30min后肝脏中药物的含量为顺铂注射液的3倍，而其他脏器如肾、脾、肺中药物浓度明显降低，说明顺铂脂质微乳/微气泡在经尾静脉注