ALK阳性T细胞淋巴瘤中两个癌相关蛋白相互作用研究

ALK阳性的ALCL是一类强攻击性的恶性淋巴瘤。我们以往的研究证实IGF-1R在此类癌细胞中高表达,对IGF-1R信号通路的抑制或阻断引起癌细胞的凋亡乃至死亡,对正常的T细胞无影响。我们最新的研究成果显示癌蛋白NPM-ALK和酪氨酸激酶IGF-1R之间存在结构和功能性相互作用,这是在此类肿瘤病因分子机制研究的突破性成果。本课题希望在此发现的基础上,利用分子生物学与遗传学方法,将已克隆野生型IGF-1R与NPM-ALK经定点突变及基因缺失突变等得到一系列等位基因，利用共表达技术及免疫共沉淀方法等研究两蛋白相互作用的分子位点;构建相关突变体稳定表达细胞系以及利用RNA干扰技术等,研究IGF-1R与NPM-ALK功能性相互作用的分子信号调控机制。结果将扩展人们对IGF-1R、NPM-ALK及ALK阳性的ALCL疾病的生物学及病因认识，为IGF-1R可能作为治疗这类肿瘤的分子靶点提供理论依据。

整个项目执行过程中基本按原实验方案进行，已超额完成原定考核指标。ALK 阳性的 ALCL 是一类强攻击性的恶性淋巴瘤。我们以往的研究证实 IGF-1R 在此类癌细胞中高表达,对 IGF-1R 信号通路的抑制或阻断引起癌细胞的凋亡乃至死亡,对正常的 T 细胞无影响。值得关注的是癌蛋白NPM-ALK 和酪氨酸激酶IGF-1R 之间存在结构和功能性相互作用,这是在此类肿瘤病因分子机制研究的突破性成果。通过本项目的实施，（1）确定了Y644和Y664是NPM- ALK蛋白序列中可能与IGF-1R的相互作用的靶位点以及Y950是IGF-1R蛋白序列中可能与IGF-1R的相互作用的靶位点；(2)筛选获得了稳定的野生型和靶位点突变体的细胞系,探讨了NPM-ALK与IGF-1R相互作用的靶位点突变体所引发的生物学性能的改变；结果显示NPM-ALK双突变体失去了与IGF-1R的相互结合，细胞减弱了克隆形成和转化能力。（3）利用SiRNA干扰技术和IGF-IR的选择性抑制剂研究了NPM-ALK和IGF-1R功能性相互作用的分子信号传导机制，证实IGF-1R与NPM-ALK相互作用在ALK阳性的ALCL中的分子调控机制。这些结果为IGF-1R可以作为治疗ALK阳性的间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）的分子靶点提供充分的理论依据，预期IGF-1R的选择性与特异性拮抗剂将在不远的未来被筛选用于相关的肿瘤治疗。在获得本项目资助的三年期间，本人共发表受本项目资助的SCI收录期刊论文12篇，国内核心期刊论文1篇；国内科技论文在线发表1篇，申请专利2项。取得4项基金的资助。