角膜细菌感染中NETs的杀菌机制及TOLL样受体对NETs形成和功能调控的研究

细菌性角膜炎起病急，如果得不到及时有效的治疗往往导致严重的视功能障碍甚至眼球丧失。新近研究发现中性粒细胞可以通过一种新的细胞外机制杀灭病原体，称为中性粒细胞胞外陷阱（NETs），为角膜细菌感染治疗提供了新的方向，本研究拟采用中性粒细胞和细菌共培养感染模型和小鼠角膜细菌感染模型，观察中性粒细胞NETs在角膜的形成情况和杀菌效率，通过Toll样受体(TLRs)激动剂和阻断剂观察NETs的形成和功能,明确NETs和TLRs的关系，并通过加入不同浓度的的糖皮质激素（GCs），研究GCs对NETs形成和杀菌效率的调控是否和TLRs相关，阐明GCs通过NETs对细菌角膜感染病程及预后的影响。本项目研究不仅可丰富细菌性角膜炎的固有免疫应答机制，同时不同浓度GCs经TLRs调控NETs形成和杀菌效率的研究结果还可为此类药物临床应用提供依据，具有较高创新性、科学价值和临床意义。

本课题拟采用中性粒细胞和细菌共培养感染模型和小鼠角膜细菌感染模型，观察中性粒细胞细胞外陷阱（neutrophil extracellular traps，NETs）的形成情况和杀菌效率，重点研究了糖皮质激素和固有免疫的关键受体在NETs形成和功能中的作用。本研究的重要发现体现在如下几个方面：1 两种不同细菌和中性粒细胞共感染模型中会出现吞噬和NETs共存的情况，这一现象有非常重要的临床意义，提示我们可以调控中性粒细胞发挥不同的杀菌作用，从而更加高效、安全去杀灭病原体；2 NETs的形成情况受不同浓度糖皮质激素的影响，随着糖皮质激素浓度的增加，NETs表现为浓度依赖性的抑制，细菌负荷量也增加，这一发现解释了为什么糖皮质激素的临床应用能导致感染的迁延；3 NETs的形成和固有免疫受体TLRs密切相关，这一结果的发现说明NETs的形成受到固有免疫的调控；4 在非感染状态下中性粒细胞也能形成NETs，说明NETs的形成可能是中性粒细胞的一种应激状态，这一发现对NETs的形成和临床意义具有相当价值；5小鼠细菌性角膜炎的转归和NETs形成密切相关。.到目前为止已经发表SCI收录论文3篇，被SCI录用论文1篇，由于本研究的部分实验尚在收尾阶段，部分数据尚在分析总结，预计2014年将形成论文2-3篇