siRNA干扰T-bet表达对移植肾体液性排斥的干预作用及机制研究

Humoral rejection(Antibody mediated rejection,AMR) is the most important cause for renal allograft function lost. However, the available therapeutic effect is barely satisfactory. Our preliminary work found that T-bet (T box expressed in T cells) expression was significantly elevated in intraglomerular and peritubular capillaries, and strongly positively correlates with lymphocyte infiltration quantity and steroid bonus theraphy reaction during acute or chronic AMR, which suggested that T-bet played a key role in the AMR pathogenisis and may act as a novel therapeutic target. Related studies had confirmed suppression of T-bet expression can prolong allogeneic skin grafts survival time, which strongly suggests down-regulating T-bet expressiong is an effective new strategy for treating acute and chronic AMR. This study will be performed to clarify the therapeutic effects of down-regulating T-bet expression by siRNA interference in acute and chronic mouse renal allograft AMR, respectively. The mechanism will be further investigated from aspects of cellular immunity, transcription factors, cytokines, antibody production and complement deposition. This study will find a new treatment for renal AMR and further improve understandings aout the pathogenesis of AMR.

体液性排斥（抗体介导的排斥，AMR）是影响移植肾远期存活最重要的原因，现有的治疗手段效果尚不理想。我们的前期工作发现，无论是急性还是慢性AMR，T-bet在移植肾肾小球毛细血管和肾小管周围毛细血管内的表达均显著升高，并且同淋巴细胞浸润数量和对激素治疗的反应显著相关。说明T-bet在AMR的发生机制中起了重要的作用，有可能成为治疗的新靶点。有研究已证实抑制T-bet表达能延长同种异基因皮肤移植物存活时间，强烈提示下调T-bet表达是治疗AMR的有效新策略。本项目将分别在小鼠肾移植模型中观察siRNA干扰下调受体T-bet表达对急性AMR和慢性排斥的干预效果，并从细胞免疫、转录因子、细胞因子、抗体产生、补体沉积等方面入手，对下调T-bet表达干预移植肾AMR的具体机制进行分析研究。该研究将为AMR的治疗找到一个新的治疗手段，并能进一步完善对AMR发病机制的认识。

体液性排斥（AMR）是影响移植肾存活的主要原因，本项目围绕AMR进行深入研究，取得一系列原创性成果。资助期间共发表SCI学术论文9篇，其中高水平论文5篇（IF＞5），包括Am J Transplant （IF 6.493） 2篇、 EBioMedicine （IF 6.183）1 篇、 Front Immunol （IF 5.511） 2篇；相应研究成果申请国内发明专利4项。项目负责人学术水平得到国内外同行认可，获选2018年国家科技部创新人才推进计划中青年科技创新领军人才、2018年广东省医学领军人才、2015年“广东特支计划”科技创新领军人才，当选国际肾脏病学会（ISN）青年工作委员会委员、Task Force委员会委员、北亚与区域委员会委员，亚太肾脏病学会（APSN）继续教育委员会委员，中华医学会器官移植学分会第七届委员会青年委员会副主任委员和第八届全国委员。并应邀担任Transplantation等三本国际期刊编委，SCI期刊Clinical & Developmental Immunology移植特刊客座主编，举办4次国际级学术会议“移植肾脏病岭南论坛”，获得业内一致好评。主要研究成果包括：改良了小鼠移植肾AMR模型，使其更接近临床特点和具有更好的实用性；证实了申报书中“体液性排斥中Th1（T-bet）→IFN-γ→M1型巨噬细胞活化可能是其重要损伤机制通路”的科学假设；发现雷公藤甲素和TGF-β诱导产生的调节性T细胞（iTreg）可以减轻AMR；利用靶向微泡技术实现了C4d的无创、定量检测，从而实现AMR的无创诊断；利用供体来源的线粒体DNA（mtDNA）水平评估肾移植术后患者预后；证实骨髓来源的间充质干细胞（MSC）用于临床排斥的防治具有很好的安全性和可行性；阐述了临床上捐献模式的特点和移植肾功能延迟恢复的评价新体系。