Nrf2/Keap1-Bach1竞争性调控HO1在金丝桃苷抗氧化性肝损伤的作用研究

Many bio-macromolecules such as Reactive Oxygen Species(ROS), damage proteins and lipides were produced during the oxidantive stress process, which attenuated the capacity of antioxidant of liver cells.Meanwhile, the homeostasis of oxidantion-disoxidantion of liver cells was also been breaked.Our previous studies showed that the Natural flavone possess a remarkable antioxidative and protective effect on liver cells, which related to the up-regulation and accentuation the acticity of the cellular protective proteins. Activation of Nrf2／Keap1-Bach1 signalling pathway could be very important to protect liver cells from injury. Thus, to explore if the Nrf2/Keap1-Bach1 signalling pathway is involved in the oxidantive liver damage is critical and a new therapy strategy for liver diseases. Nrf2/Keap1-Bach1 competive regulation of HO1 on the protecting effect of Hyperoside in antioxidant to liver，The results will abundant the bioactivity of hyperoside and will be helpful for the exploitation of natural flavone to provide a potential mechanism of therapy stragy for oxidative stress liver diseases.

氧化应激通过产生过多的活性氧自由基（ROS）、损伤蛋白、脂质等生物大分子、减弱肝细胞内源性抗氧化能力，进而打破肝脏的氧化-还原平衡稳态，造成肝细胞结构和功能损伤而参与各种肝脏疾病的病理生理过程。Nrf1／Keap1-Bach1信号通路的激活常常是药物通过诱导抗氧化基因（细胞保护基因）、增强细胞内源性抗氧化能力的关键，并能减轻乙醇、药物等多种氧化应激因素导致的肝损伤。课题组前期研究发现，天然黄酮类物质金丝桃苷（Hyp）具有明显的肝保护效应，且与上调细胞保护蛋白水平、增强细胞保护蛋白活性相关。本研究拟在进一步明确Hyp的肝细胞保护效应基础上，探讨Nrf2/Keap1-Bach1竞争性调控HO1在Hyp抗氧化性肝细胞损伤中的作用，并探讨Hyp对该通路的负反馈信号（Nrf2诱导时效性）的调节机制。研究结果有助于深入阐述Hyp的抗氧化作用机制，为抗氧化性肝损伤药物的开发提供理论依据。

氧化应激所致的肝细胞氧化‐还原稳态失衡是各种肝脏疾病发病机制中的关键环节。Nrf2/Keap1-Bach1 信号通路的激活是药物通过诱导抗氧化基因而增强细胞内源性抗氧化能力的关键。本项目首先建立了稳定的氧化应激损伤细胞模型，展开了金丝桃苷（Hyp）对损伤细胞的保护效应及对抗氧化基因 HO-1 表达水平及活性影响的相关研究、Hyp 对 Nrf2 表达及核转位的调节作用研究、Hyp 对 Bach1 表达及分布的影响及运输蛋白 Crm1 和转录因子 MafK 在 Hyp 调控 Bach1 分布中的作用研究，以及 Hyp 对 Nrf2-Bach1 竞争性结合 ARE 的调控作用研究。通过课题组成员的共同努力，圆满完成了所有研究任务并取得如下发现：Hyp 可通过促进 Nrf2/Keap1-Bach1 信号通路中 Nrf2 表达及核转位以及早期运输蛋白 Crm1 依赖的 Bach1转移出核，上调抗氧化基因 HO-1 表达水平及活性，从而发挥抗氧化应激损伤作用。此外 Hyp 可提升 Nrf2 与 ARE 结合水平，同时在早期降低 Bach1 与 ARE 的结合水平。综上所述，本项目以 Hyp 为工具药、HO-1 为代表酶，基于 Nrf2-Bach1 表达、分布及其竞争性调控，探讨了 Hyp 的肝保护效应与机制，为深入阐述 Hyp 的抗氧化作用机制和抗氧化性肝损伤药物的开发奠定了理论基础。