加味丹参饮对骨髓干细胞促IRI血瘀证鼠心肌血管新生的影响及机制研究

随着心脏介入水平的提高，以及心脏外科学的发展，缺血心肌在恢复血流灌注的过程，会出现再灌注损伤，如何有效预防和治疗心肌IRI是近年科研的研究重点，研究表明多种中药对干细胞的定向分化有调控作用。.课题研究加味丹参饮对骨髓干细胞移植IRI血瘀证鼠心肌血管新生的动态影响。以JAK-STAT信号转导途径为切入点，构建VEGF基因工程骨髓干细胞，移植于IRI血瘀证鼠，通过不同时间点观察JAK2-PI3K途径和JAK2-STAT5途径交互作用，研究加味丹参饮对VEGF基因工程骨髓干细胞移植IRI血瘀证鼠心肌细胞JAK2-PI3K信号转导网络调控作用。以骨髓干细胞中内皮祖细胞为切入点，采用rhEPO腹腔注射IRI血瘀证鼠，经过STAT阻断剂处理，观察血管内皮功能、内皮祖细胞和细胞JAK2-STAT5信号途径，研究加味丹参饮动员内皮祖细胞对IRI血瘀证鼠心肌血管新生的影响。本课题完成有广阔的应用前景。

摘要：目的：1.探讨加味丹参饮（Jia Wei Dan Shen Yin JWDSY）在体外能否诱导骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells BMSCs）向心肌样细胞分化，以及JWDSY对BMSCs移植心肌梗死心血瘀阻型大鼠心肌的作用。2. 建立大鼠心肌缺血再灌注损伤（IRI）模型，观察加味丹参饮(JWDSY)含药血清体外诱导的骨髓间充质干细胞(BMSCs) 移植对IRI大鼠的心脏保护作用，探讨其对心肌IRI大鼠血管新生的动态影响和作用机制。.方法：采用全骨髓贴壁法培养大鼠BMSCs，并进行传代、扩增，对细胞形态学和生长特性进行观察，通过流式细胞术对细胞表面抗原CD90、CD11b、CD45进行表型鉴定。建立心肌IRI大鼠模型，随机分为四组：假手术组、模型组、空白血清诱导的BMSCs组和加味丹参饮含药血清诱导的BMSCs组。采用心肌内直接注射移植的方法，在动物造模成功后立即将诱导后的移植细胞分3点注射到梗死边缘区的心肌内，模型组和假手术组注射等量的L-DMEM。肉眼观察结扎部位的大体表现，分别于移植后3d、7d、14d三个时相点，免疫组化、放射免疫、RT-PCR及western blot检测相应指标。.结论：(1)JWDSY在体外能促进BMSCs向心肌样细胞分化(2) 在心梗心血瘀阻证大鼠模型中JWDSY组、BMSCs组和JWDSY+BMSCs.均能促进新生血管，增加移植细胞的血供，能缩小梗死面积。而JWDSY能促进BMSCs移植后的血管新生和减少瘢痕形成。.(3)在心梗心血瘀阻证大鼠模型中JWDSY能促进移植的BMSCs向心肌样细胞分化，JWDSY与BMSCs移植联合应用的疗效较单用更佳。