母乳微生物和婴儿肠道菌群间关系的研究

There are many kinds of bioactive components in breast milk. The microorganisms are important component of breast milk. As one of the first to enter the gastrointestinal microorganisms of new infant, the bacteria of breast milk produce profound and long influence on new infant intestinal and immune system. So the study on influence of breast milk microorganisms to the new intestinal flora and immune of the infant, that is to say the relationship of breast milk microorganisms and infant intestinal flora is of great significance. In this research, a certain number of breast milk and microorganisms in intestinal microflora of new infant were collected to determine the sampling. It can be determined complex microbial flora and bacterial phase change of breast milk and the intestinal flora of new infant based on high -throughput sequencing method. It can be identified microbial species in breast milk and new infant intestinal and determined the relationship between them by isolation and identification of microbial 16S rRNA from the microorganisms of breast milk (colostrum and milk) and new infant intestinal flora. It can be determined the effect on microorganisms composition in breast milk because of different body weight and modes of birth of pregnant women. It can be identified the origin and the function to new infant of microorganisms in breast milk. Thus it can be clarified the relationship between breast milk microorganisms and infant intestinal flora to demonstrate the importance of breast-feeding in infants.

母乳中有着多种生物活性成分，微生物就是重要组分之一。而母乳中的细菌作为第一批进入到新生子代胃肠道的微生物，对新生子代肠道、免疫系统等影响深刻且长久。因此研究母乳中的微生物对新生子代肠道菌群及免疫作用的影响，即母乳微生物和婴儿肠道菌群的关系有着重要意义。本研究拟通过对一定数量母体乳汁中及新生子代肠道菌群中的微生物进行跟踪收集取样，利用高通量测序方法确定母体乳汁中及新生子代肠道菌群中的复杂微生物区系及菌相变化；对母体乳汁中（初乳及常乳）及新生子代肠道菌群中的微生物分离培养并对微生物进行16SrRNA鉴定，确定母乳中及新生子代肠道中微生物的种类，明确二者之间的关系；确定孕产妇的不同体质量指数值和不同的生产方式对乳汁中微生物组成的影响；明确母乳中微生物来源的主要途径及母乳中微生物对新生子代的作用。从而阐明母乳微生物和婴儿肠道菌群间的关系，进一步论证母乳喂养对婴儿的重要性。

母乳中的细菌作为第一批进入到新生子代胃肠道的微生物，对新生子代肠道、免疫系统等影响深刻且长久。因此研究母乳中的微生物对新生子代肠道菌群及免疫作用的影响，即母乳微生物和婴儿肠道菌群的关系有着重要意义。本研究通过Illumina NovaSeq对第1d，14d，20d，30d，90d的母乳、婴儿肠道粪便的微生物进行16S rRNA V3-V4区测序，结果发现母乳中含量较多的菌有不动杆菌、假单胞菌、乳酸杆菌、类杆菌、链球菌，还存在少量的双歧杆菌、克雷伯氏菌等，婴儿肠道粪便中较多的是双歧杆菌、大肠杆菌-志贺氏菌、克雷伯氏菌、链球菌、类杆菌、乳酸杆菌，不动杆菌、假单胞菌在婴儿粪便中也有少量存在，其中不动杆菌、双歧杆菌、克雷伯氏菌、乳酸杆菌等存在由母乳向婴儿肠道转移的现象。以耐人工消化液能力、耐胆盐能力、黏附能力等为指标，筛选出具有潜在益生功能的菌株，通过对其16S rRNA测序进行鉴定。不同分娩方式的婴儿肠道粪便和母亲产道液体菌群相似性分析显示，自然分娩的婴儿肠道粪便菌群与其母亲产道菌群的相似性显著高于剖宫产组，表明新生儿在自然分娩过程中可能存在微生物接种的过程。及根据不同分娩方式塑造的不同的婴儿肠道微生物特征，提倡采用顺产方式进行生产。对母乳和乳晕皮肤、婴儿口腔的微生物生态系统进行研究，及在围产期和哺乳期母体服用益生菌后婴儿肠道菌群的研究，明确了婴儿肠道粪便微生物主要来源于母乳传递途径，又部分来源于外源途径。根据以上各项指标筛选出三株益生菌株，进行动物实验，观察对新生子代的作用，结果表明对该菌株的体外安全性及益生功能进行评估，该菌株具备一定的安全性并能够在小鼠肠道中具有一定的定植能力及体内免疫调节功能。本研究成果以期促进我国益生菌的本土化，掌握自身菌种开发的核心技术，同时也为婴幼儿功能性食品开发提供优良的菌种资源。